扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌纤维化及TGF-β1/Smads信号通路的影响
卡托普利,1材料与方法,2结果,3讨论
,,,,,, , ,心肌纤维化是多种心血管疾病发展到一定阶段的共同病理改变,是心肌重构的主要表现之一,可致心肌僵硬度增加、心室舒张功能减退、心律失常,甚至猝死,是影响心血管疾病预后极为重要的因素。预防和逆转心肌纤维化已成为防治心血管系统疾病的焦点之一。转化生长因子-β1(TGF-β1)是最重要的致纤维化生长因子之一[1-2],可促进细胞的增殖、分化和胶原的合成、结缔组织增生,同时对胶原的降解具有抑制作用[3-4],Smads蛋白是TGF-β的下游信号分子之一,介导TGF-β1的细胞内信号转导。TGFβ/Smads信号通路与心肌纤维化密切相关,对心肌梗死后纤维化的发生具有促进作用[5- 6]。扶正化瘀胶囊主要由丹参、桃仁、松花粉、五味子、绞股蓝、虫草菌丝等药物组成。前期研究证实,扶正化瘀胶囊对心肌纤维化具有改善作用[7],但其具体作用机制尚不明确。本研究拟制作心肌梗死后心肌纤维化大鼠模型,观察扶正化瘀胶囊对模型大鼠TGF-β1/Smads通路中主要因子TGF-β1、smad3、smad4、smad7的影响,探讨其抗心肌纤维化的可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物 雄性SD大鼠,清洁级,体重220 g~250 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,许可证编号:SCXK(京)2002-0003,饲养于北京中医药大学东直门医院屏障动物室。
1.2 药物及试剂 扶正化瘀胶囊(上海黄海制药有限责任公司生产,批号151040);卡托普利片(中美上海施贵宝制药有限公司生产,批号AAD7212);Trizol试剂(批号:15596026,Ambion公司);反转录试剂盒(批号:K1662,Thermo Fisher Scientific);SYBR Select Master Mix (批号:4472908,Applied Biosystems);目的基因引物由北京赛诺基因组研究所中心有限公司合成;兔源单克隆抗体β-actin(ab8227),兔源多克隆抗体TGF-β1(ab92486),兔源单克隆抗体smad 3(ab40854)、兔源单克隆抗体smad4(ab40759)、兔源多克隆抗体smad7(ab190987)、兔源单克隆抗体GAPDH(ab181602)均购自英国abcam公司,RIPA裂解缓冲液(批号:C1053)、蛋白酶抑制剂混合物(型号:P1265)、蛋白质定量试剂盒(型号:P1511)、5%脱脂奶粉(型号:P1622)、柯达胶片(型号:E1122)均来源于北京普利莱基因技术有限公司 ......
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