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    急性脑梗死(ACI)有着极高的致死率和致残率，严重威胁着人们的健康[1]，是继恶性肿瘤、心肌梗死后又一严重影响人类健康的疾病[2]。脑梗死后中枢神经元受损，给病人带来诸多问题，因此，积极开展新型有效的治疗手段，促进中枢神经功能的恢复，降低致死率及致残率，显得尤为重要。近年来，随着对脑血管病研究的深入，头针治疗作为发病后有效的治疗手段之一，早期或者超早期头针治疗对缺血脑组织的保护及修复作用和内在的作用机制成为研究的重点，对临床具有重要指导意义[3]。本研究以CD40、CD40L为切入点，通过头针电刺激干预大鼠右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)局灶性脑缺血模型，观察脑组织中CD40、CD40L表达的变化及神经功能缺损情况，探究头针电刺激对脑梗死可能的作用机制，为头针电刺激早期治疗提供重要的理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 动物及分组 健康雄性Wistar大鼠96只，清洁级，体重240 g～280 g，由湖北省实验动物研究中心提供，动物合格证号：[SCXK(鄂)2015 -0005]。所有大鼠在实验室常规饲养1周，自由进食、饮水，通风、自然光照，5只或6只分笼饲养。所有Wistar大鼠采用随机数字表法分为头针电刺激组、假手术组和模型对照组，每组又分为1 d组、3 d组、7 d组和14 d组4个亚组，每组8只大鼠，并用苦味酸标记编号。

    1.1.2 主要实验试剂及仪器 即用型免疫组化Elivision TM plus试剂盒，购自武汉博士德生物制品有限公司；浓缩型兔抗人CD40与CD40L单克隆抗体(一抗)、酶标抗鼠/兔聚合物(二抗)，美国MILLIPORE公司生产，购自上海雅吉生物科技有限公司；DAB显色试剂盒，购自福建迈新生物技术有限公司；磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline，PBS)自行配制；10%水合氯醛，实验室提供；切片机(德国ZEISS公司)；光学显微镜；医用水浴箱、酶标仪、低温电冰箱；一端经过石蜡制备后的渔线(长度：15 mm)；华佗牌一次性无菌针灸针，规格：0.20 mm×25 mm，苏州医疗用品厂有限公司生产；KDZ -Ⅱ型电针仪(扬州市凯达医疗设备)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 大鼠模型制备 参照Zea Longa改良线栓法[4]制备右侧大脑中动脉阻塞动物模型 ......