高胆红素血症及胆红素脑病新生大鼠模型的建立与评价
神经细胞,胶质,1材料与方法,2结果,3讨论
,,,新生儿黄疸或高胆红素血症是一组由于胆红素代谢异常在体内积聚引起的可见皮肤或其他器官黄染,是新生儿期最常见的临床问题,其发病率高达60%~85%[1],并可致胆红素脑病,但胆红素脑病的神经系统损害早期是可逆的。目前有效的预测方法是根据健康新生儿的小时胆红素列线图及个体化随访计划结合头颅核磁来判断[2]。然而胆红素神经毒性的作用机制及环节尚不清楚,因此,建立合适的动物模型,对有效降低严重高胆红素血症的风险,避免胆红素脑病的发生及评估胆红素脑病是至关重要的。本研究根据7 d龄新生SD大鼠,利用超微结构下观察发现其脑组织发育不完善[3],血脑屏障的重要组成成分脑血管内皮细胞[4]及星形胶质细胞容易受到胆红素的破坏等特点,腹腔注射不同剂量的胆红素,并进行相关指标测定和评价,建立稳定的动物模型。
1 材料与方法
1.1 实验动物 选择7 d龄清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,体重11 g~17 g,雌雄不限,由山西医科大学动物实验中心提供。
1.2 药品及试剂 晶体胆红素(美国Sigma公司),总胆红素(南京建成生物工程研究所),S-100 β试剂盒(武汉贝茵莱生物科技公司),神经细胞凋亡率试剂盒(罗氏公司)。
1.3 主要仪器 电子天平,多功能全波长酶标仪(Thermo),石蜡包埋机(EG1150Hfc),轮转切片机(RM225),显微照相(OLYMPU BH-2)。
1.4 实验方法
1.4.1 胆红素的配制 避光称取晶体胆红素20 mg,溶于0.1 mL 0.5 mol/L氢氧化钠溶液中,并加入双蒸水0.9 mL ......
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