一种新型apoE-/-小鼠动脉粥样硬化和心肌梗死双模型的建立
高脂,主动脉,1材料与方法,2结果,3讨论
,,,, ,,,,目前,心血管疾病仍然是威胁全球人类健康的主要疾病,是重要的公共卫生问题。冠心病的防治及发病机制的研究始终是热点问题[1-3]。动脉粥样硬化(AS)是引起急性心肌梗死(AMI)的主要发病原因,在动物模型研究中,研究者通常将动脉粥样硬化和心肌梗死分别造模进行研究。然而,在实际临床中动脉粥样硬化和心肌梗死是并存的,冠心病的防治干预评估需要同时关注其对动脉粥样硬化和心肌梗死的综合影响[4]。因此,很有必要在同一生物体内探索建立动脉粥样硬化和心肌梗死并存的动物双模型,为中西医结合防治冠心病研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 选择雄性apoE-/-小鼠,其不同动物个体之间组织差异性较小,行为学稳定。apoE-/-小鼠由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[SCXK(京)2012-0001],SPF级,体重20 g~25 g,共35只,6周龄。分笼饲养,每笼5只,共7笼。实验场地由上海市中医药大学动物房提供,SPF级条件下饲养管理,室温(22±1)℃,相对湿度40%~60%,12 h明暗循环照明。高脂饮食组30只,第12周时制备急性心肌梗死模型,继续饲养3周至实验终点。普通饮食组5只作为对照组。
1.2 主要仪器和试剂 小动物专用吸入麻醉机 VMR:美国MIDMARK集团;2%异氟烷:北京众实迪创公司;实验用冷光源 F-150C:RWD;小动物心电图机:上海玉研;光学显微镜 CX41RF:Olympus;ImageMeasure图像分析软件:上海申腾信息技术有限公司生产等。
1.3 apoE-/-小鼠AS和AMI双模型的制备 高脂饲料配方:基础小鼠饲料89.8%、脂肪10%和胆固醇0.15%。第12周术前1 d禁水、禁食,apoE-/-小鼠根据Gao等[5]报道的手术方法造模。术前每笼小鼠置于麻醉诱导箱予2%异氟烷气体诱导麻醉(0.3 mL/min),并维持小鼠头套麻醉(见图1),待小鼠全部无活动后,用脱毛膏涂抹于小鼠胸部脱毛,轻轻按摩并用纱布擦拭脱毛,将小鼠四肢固定于鼠板。冷光源直视条件下,取左胸第四肋间(观察到心尖搏动点)做1个皮肤小切口(约1.2 cm),逐层剥离胸大肌、胸小肌。

图A:异氟烷气体麻醉机;图B:头套异氟烷气体维持麻醉 ......
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