， ， ，仁英

    心肌纤维化(myocardial fibrosis，MF)是多种心脏疾病发展至终末期的共同病理改变，可致心室顺应性和收缩功能下降而发生心力衰竭[1-2]。心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts，CF)是MF的主要因素，MF主要是由于CF增殖和胶原蛋白的过量表达、分泌和堆积的结果[3]。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)是目前公认的促心肌纤维化因素，可引起CF增殖和胶原蛋白合成，从而导致心肌纤维化[4]。

    金银花(Lonicerae Flos)，又名双花、忍冬花，为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)的干燥花蕾或带初开的花，为常用中药，药用历史悠久[5]。黄酮类化合物(flavonoids)为金银花的有效成分之一，有研究表明黄酮类化合物具有良好的抗氧化、清除自由基、抗炎及调节心血管系统等作用，对冠心病、心绞痛、心血管疾病有较好效果[6-7]，但金银花黄酮类化合物对CF的增殖及其作用机制研究甚少。本研究观察金银花黄酮类提取物对AngⅡ诱导的大鼠CF的增殖及Ⅰ型胶原合成的影响，探讨金银花黄酮类提取物抗MF的作用及其机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 出生2 d～3 d的SD大鼠，SPF级，雌雄不限，由中山大学北校区实验动物中心提供。

    1.1.2 实验药品与试剂 金银花药材：购自亳州市京皖中药饮片厂，经鉴定为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花；血管紧张素Ⅱ(Sigma公司)；杜氏改良Eagle(DMEM)培养基(GIBCO公司)；胎牛血清(GIBCO公司)；胰蛋白-EDTA消化液(GIBICO公司)；二甲亚砜(Sigma公司)；Ⅰ型胶原蛋白一抗(美国Cell Signaling Technology公司)；二抗羊抗兔IgG(美国LI-COR Biosciences)；十二烷基硫酸钠-聚丙烯硫胺凝胶配制试剂盒和二辛可宁酸蛋白浓度测定试剂盒(武汉谷歌生物有限公司)；RNA提取试剂Trizol(美国Invitrogen公司)；逆转录试剂盒及逆转录-聚合酶链反应试剂盒(TaKaRa公司)；引物由武汉巴菲尔生物技术服务有限公司设计并合成；细胞计数(CCK-8)试剂盒(日本同仁研究所)；细胞周期检测试剂盒(南京凯基生物)；其余试剂均为国产分析纯 ......