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    慢性脑供血不足是由各种原因导致大脑出现慢性灌注不足，从而引发大脑缺血、缺氧出现的脑功能障碍的疾病。而学习记忆能力明显下降是脑供血不足主要临床表现之一。诸多临床及实验研究发现，针灸治疗可以明显改善脑供血及学习记忆能力，但对其分子机制的研究至今还不明确。

    本研究采用双血管阻断法(2-VO)造成慢性脑灌注不足大鼠模型，从调节脑与神经发生密切相关的神经诱导因子Noggin及其拮抗剂骨结合蛋白-4(bone morphogenetic protein 4，BMP4)的表达为切入点，观察慢性脑缺血大鼠及电针治疗时海马新生细胞的增殖、分化等神经发生的变化规律，探讨Noggin与BMP4在电针治疗中对神经发生的影响，以期待从神经生物学角度阐明针灸治疗慢性脑缺血损伤疾病作用机制，为针灸治疗脑缺血疾病提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 实验用3个月龄雄性SD大鼠108只，体重210 g±30 g，由山西医科大学实验动物中心提供。将大鼠随机分为假手术组与手术组，造模后将手术组随机分为模型组与电针组，然后将假手术组、模型组、电针组大鼠再按缺血1周、2周、4周分为3个亚组，每个亚组12只。

    1.2 动物模型制备 按Ni等[1]方法永久性结扎双侧颈总动脉制作慢性脑灌注不足大鼠模型。大鼠称重后用10%水合氯醛(3.5 mL/kg)腹腔注射麻醉，将大鼠仰卧位固定于手术台上，暴露颈部，局部备皮，用聚维酮碘(PV)消毒后行颈部正中切开术，分离双侧颈总动脉，后用4#缝合线结扎，确保阻断动脉血流，缝合切口。

    1.3 电针治疗方法 自制捕鼠器固定大鼠头部，参照《实验针灸学》[2]中大鼠穴位定位方法取“百会”和“大椎”穴，用0.5寸针灸针针刺穴位，“百会”穴刺法：从“百会”穴沿头顶正中线向后斜平刺0.5 cm；“大椎”穴刺法：直刺0.5 cm。将韩氏穴位神经刺激仪的输出线连接两穴位针灸针，调节刺激参数：输出电流1 mA，频率15 Hz连续波，时间20 min。大鼠头部一般会出现轻微抖动，每天1次，治疗7次后休息1 d。

    1.4 细胞标记及取材方法 B5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记：各组大鼠每组随机抽取6只，在术后第4天进行BrdU腹腔注射，连续注射3 d，每日2次(间隔12 h)，以观察新生细胞增殖、分化情况。按不同要求处死大鼠后取材，进行各项指标检测。取材方法：①取标记BrdU的大鼠(取BrdU标记者，每组6只)，10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，用生理盐水经左心室、升主动脉灌注 ......