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    神经胶质瘤是一种源于神经胶质细胞的脑部恶性肿瘤，是最常见的颅内肿瘤，尽管目前在神经胶质瘤的诊断、外科手术以及放化疗上取得了很大的进步，但是目前神经胶质瘤在治疗上仍面临着很大的困难，预后较差。就目前而言，神经胶质瘤病人接受广泛外科手术切除和术后辅助放化疗后平均生存期时间在14.6个月左右[1]。然而，最近10年在恶性胶质瘤细胞生物学的研究上大大提高了对恶性胶质瘤发生机制的认识，特别是神经胶质瘤干细胞，它是一个罕见的具有肿瘤干细胞特点的族群，这可能对研究恶性胶质瘤治疗后复发有帮助，和干细胞相似，神经胶质瘤干细胞具有自我更新复制能力，耐放疗及耐化疗，而且在大脑里面有侵袭转移能力以及很高的增殖潜能。少量神经胶质瘤干细胞经过治疗后幸存下来并快速增殖，重新形成胶质瘤[2]。因此，最新的抗胶质瘤治疗研究进展中旨在消除胶质瘤干细胞，防止恶性胶质瘤的复发。神经胶质瘤干细胞可能在肿瘤发生和肿瘤的复发中发挥着重要作用，找到能彻底杀灭神经胶质瘤干细胞的方法，消除这种神经胶质瘤干细胞种群，可能给临床治疗神经胶质瘤带来新的希望。因此，对神经胶质瘤干细胞的功能分析和发病机制进行详细的了解至关重要。这些发现为神经胶质瘤干细胞的生物学特性和对脑部肿瘤靶向治疗提供了一个开放的新视角。本实验经过分离提取并鉴定神经胶质瘤干细胞，对后期神经胶质瘤的发生机制、治疗及取得良好的治疗效果进行前期研究具有重要意义。

    1 材料与方法

    1.1 标本 十堰市太和医院神经外科术中的神经胶质瘤，术后病理诊断为间变型星形胶质细胞瘤，WHOⅢ级，IHC：GFAP(+)，S-100(+)，NeuN(-)，Ki-67(20%)。

    1.2 实验方法 病人术前未行放化疗和手术。取5个位点的脑肿瘤组织各1块，直径(5～10) mm，浸入无菌2 mL 无血清DMEM/F12培养液瓶中保鲜，外加无菌敷料严密包被，立即于30 min内送实验室进行分离培养。吸出标本瓶中上层液体，加入0.05%的胰蛋白酶2 mL于标本瓶中，吸引管反复吹打混匀消化后，移入培养皿中，剪刀反复剪碎，剪成更小组织碎片，玻片反复研磨，10%FBS终止消化；吸引管反复吹打，重悬，混匀后200筛网过滤，然后将过滤后的液体于离心机上以1 000 r/min离心5 min，去上清。再用PBS液反复洗涤3次，离心后去上清。制成单细胞悬液，最后将细胞浓度调整为(0.5～1.0)×108个/mL，于多聚赖氨酸预处理过的六孔板上分别种植单细胞悬液 ......