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    近年来，糖尿病的发病率逐年增高，血管并发症是糖尿病致死致残的主要原因。而血管内皮功能损伤是糖尿病血管病变发生的始动因素和主要病理生理学基础，甚至在尚未出现慢性血管并发症的糖尿病病人已出现内皮功能明显降低。高血糖可以通过多种机制损伤血管内皮细胞功能，如氧化应激、炎症、蛋白质非酶糖基化、继发性脂代谢紊乱等[1]。近期研究发现新型麻醉药七氟醚有心血管保护作用。本研究对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECS)进行高浓度葡萄糖处理，模拟糖尿病体内环境，通过检测细胞凋亡率观察内皮细胞的损伤情况及七氟醚对受损内皮细胞的保护作用，并从细胞增殖、凋亡与抗凋亡以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达改变及超氧化物歧化酶(SOD)抗氧化等多个角度探讨其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂 细胞培养试剂均购自Gibco公司，人脐静脉内皮细胞由山西医科大学第一医院提供，七氟醚免疫细胞化学试剂盒购自博士德公司。

    1.2 原代人脐静脉内皮细胞鉴定 人脐静脉内皮细胞培养在含10%胎牛血清RPMI1640培养基中，37 ℃，5%CO2培养。人脐静脉内皮细胞密度达到70%左右时在倒置显微镜下摄片观察细胞形态，用兔抗人Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ因子RAg)多克隆抗体进行。

    1.3 实验分组 人脐静脉内皮细胞生长至70%～80%融合时，分为4组：正常糖浓度组(A组，5.5 mmol/L葡萄糖)、高葡萄糖组(B组，25 mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(C组，5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)、高葡萄糖(25 mmol/L葡萄糖)+七氟醚组(D组) ......