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编号:221249
TLR4介导小鼠小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制研究
http://www.100md.com 2019年4月17日 中西医结合心脑血管病杂志 2019年第5期
试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
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    脑出血是指非外伤性脑实质内血管破裂引起的出血,占全部脑卒中的20%~30%,急性期病死率为30%~40%,发生的原因主要与脑血管病变有关[1]。脑出血在我国的发病率逐年上升,其具有较高的伤残率,已严重影响病人的生活质量和生命健康。因此,深入研究脑出血的发病机制以及脑出血的新治疗靶点具有重要的临床意义。对于脑出血的机制研究,多数研究都是关注血管内皮细胞,对小胶质细胞的研究较少。目前有少量研究结果表明,小胶质细胞介导的自噬反应对脑出血后的炎症损伤起着非常重要的作用[2]。适当激活小胶质细胞时,可促进脑损伤的自动修复,但小胶质细胞过度活化时,将可能加重损伤[3]。小胶质细胞自噬的发生与脑出血炎症损伤息息相关。有少量研究表明,TLR4相关信号通路,即TLR4/ MyD88/核转录因子(NF-κB)信号通路参与调控小胶质细胞自噬、炎症损伤等多个方面[4]。但关于TLR4介导的小胶质细胞自噬在脑出血炎症损伤中作用的研究较少。因此,本研究探讨TLR4介导小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用及机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂和仪器 C57BL/6J小鼠购于北京维通利华实验动物技术有限公司;二抗购自碧云天公司;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所;Trizol试剂盒、逆转录试剂盒、PCR扩增试剂盒均购自坦克拉公司;质粒及配套转染配套试剂均购自广州RiboBio公司。TGL-16G-A型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);流式细胞仪(美国BD公司);7300型实时荧光定量PC电子天平R仪(美国Applied Biosystems公司);基础电泳仪(美国Bio-Rad公司);EL204(上海特勒-托多利多仪器有限公司);凝胶成像仪(美国Bio-Rad公司);电泳仪(北京六一仪器厂) ......

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