心脏干细胞(cardiac stem cells，CSCs)移植治疗缺血性心肌病具有广阔的应用前景，但移植细胞的高凋亡率是影响干细胞疗法疗效的重要原因。如何提高干细胞在缺血、缺氧环境的生存率成为目前研究的热点。干细胞领域相关研究显示，在多种应激状态下，适当自噬可提高干细胞抗凋亡能力[1-3]。多种化学物质通过改善应激状态下干细胞自噬，可提高细胞抗凋亡能力[4]。本研究探讨中药复方鹿红方(LHF)对氧糖剥夺模型CSCs自噬和CSCs抗凋亡能力的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 CSCs及实验药物 CSCs购自Lonza公司；鹿红方由上海中医药大学附属曙光医院制剂室提供，由鹿角片、红花、仙灵脾、补骨脂、女贞子、山萸肉、沉香按15∶9∶30∶20∶15∶30∶6 比例配制。鹿红方水提物制备方法如下：将药材置不锈钢锅中，加适量水浸泡1 h，置于电磁炉上，先用大火煮沸后，再用小火保持微沸煎煮1 h，18层纱布过滤，滤液备用；另外再加适量水同法再煎煮1次，18层纱布滤过，合并两次药液，于60 ℃旋转蒸发仪减压浓缩至干，在60 ℃真空干燥，干膏称重，再碾为均匀细粉，备用。

    1.1.2 主要实验试剂 DMEM/F12培养基、IMDM培养基、胎牛血清、无血清培养基均购自美国GIBCO公司；细胞计数试剂盒(cell counting kit-8，CCK-8)试剂盒购自上海易色公司；自噬抑制剂3-MA购自美国Sigma公司；GAPDH抗体购自天津三箭公司；Beclin-1、LC3-Ⅱ兔抗购自英国Abcam公司。

    1.1.3 主要实验仪器 三气培养箱购自日本松下公司；水浴恒温摇床购自上海汉诺公司；CO2细胞培养箱购自美国Thermo公司；超净台，购自美国BioX公司；多功能酶标仪T0-3型购自瑞士Tecan公司；-80 ℃冰箱购自日本Sanyo公司 ......