活血益气方是基于冠心病气虚血瘀病机构建的临床经验方，前期多项动物实验研究证实本方可激活血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达，促进心肌梗死后血管新生，增加心肌侧支循环的建立，具有提高后心力衰竭心脏功能和逆转左室重构改善心肌缺血的作用[1-4]。从细胞机制来讲，血管内皮细胞是缺血性心脏病中血管新生的主要靶细胞，内皮细胞的增殖及其与基底膜解离并穿过血管壁移行到血管周围间隙，进而黏附、芽生，形成管腔结构等一系列过程是血管新生的关键步骤[5]。人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)是研究血管生成的主要细胞，通过检测HUVEC的增殖及迁移能力可用于评估血管生成的能力。前期研究表明，活血益气方及其拆方可明显促进缺氧后HUVEC的增殖并抑制其凋亡，作用机制可能与调节PKC/Ras/ Raf-1信号通路和减少氧化应激损伤有关[6]。然而，活血益气方及其拆方对内皮细胞增殖之后其他重要环节的调控作用尚未可知。为进一步明确活血益气方及其拆方促血管新生的细胞机制及配伍规律，本研究通过建立HUVEC缺氧模型模拟心肌缺血缺氧的病理环境，观察活血益气方及其拆方药物血清对缺氧HUVEC迁移能力的影响，并通过研究其对细胞迁移粘着斑激酶(focal adhesion kinase，FAK)和应激活化蛋白激酶-2(mitogen-activated protein kinases-2，p38)-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的作用，进一步探索活血益气方促进内皮细胞迁移的分子调控机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞及动物 原代人脐静脉内皮细胞(Scien Cell研究实验室，批号：15482)。成年健康雄性SD大鼠32只，7周龄，体重230～250 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室SPF级屏障动物房，动物许可证号：SCXK(京)2012-0001。

    1.2 药物及试剂 活血益气方：黄芪60 g，党参60 g，丹参10 g，川芎10 g，赤芍10 g，红花10 g；活血方：丹参10 g，川芎10 g，赤芍10 g，红花10 g；益气方：黄芪60 g，党参60 g。所有药物均采用免煎颗粒 ......