由细胞凋亡途径探讨参附注射液对脓毒症小鼠心功能的影响
心肌细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
脓毒症是重症医学科常见的急危重症,因其发病率、住院病死率、住院费用居高不下等原因,是急危重症医学面临的重要挑战之一[1]。心功能障碍是脓毒症主要并发症之一,直接与死亡率和临床预后密切相关。脓毒症心功能障碍的发病机制非常复杂,既往研究主要集中在炎症级联反应、氧化应激、再灌注损伤等病理过程[2]。越来越多的研究表明,心肌细胞过度凋亡在脓毒症心脏功能损害过程中发挥核心作用,尤其是其造成微循环障碍、内皮损伤、免疫功能麻痹等,被认为是脓毒症心功能障碍发生的重要机制[3]。中医病因病机理论认为,“急性虚证”是脓毒症发病的关键环节,益气温阳治法在临床应用中取得了满意的效果[4]。作为益气温阳代表药物,参附注射液在脓毒症的治疗中己逐渐引起人们的关注[5]。本研究拟采用国际公认的盲肠结扎穿孔法(CLP)构建脓毒症小鼠模型,采用小动物彩超评估心脏功能,苏木精-伊红(HE)染色评价心肌病理损伤,采用脱氧核普酸转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测心脏组织中心肌损伤标记物,以初步探讨参附注射液对脓毒症模型小鼠心肌细胞凋亡和心功能的影响。1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级雄性C57BL6小鼠120只,体重(30±3)g,健康状况良好,10周龄,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号:2017X119231-2。实验环境设施合格证号:SYXK(粤)2001-00932;小鼠自由进食饮水,室内温度(22±2)℃,人工光暗周期12 h,所有实验均遵循相关法律法规和广州中医药大学第一附属医院实验动物伦理规范。
1.2 试剂与仪器 参附注射液购于华润三九药业有限公司;实验用血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和B型利钠肽(BNP)试剂盒购自上海欣普生物科技公司提供 ......
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