双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血NF-κBp65蛋白表达的影响
心肌细胞,炎症,1材料与方法,2结果,3讨论
心肌短时间缺血致其无法得到充足的营养,再通后会造成心肌一定程度损伤,称为急性心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)。MIRI常伴炎症反应,血中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等大量释放,介导心肌氧化损伤,使损伤恶化加重。NF-κBp65是细胞核内重要的转录调节因子,在炎症因子的刺激下,NF-κBp65通常依赖经典信号途径被活化,介导细胞凋亡。本实验采用左冠状动脉结扎法复制大鼠心肌缺血模型,观察双参通脉颗粒对心功能的保护作用,探讨其对炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织NF-κBp65蛋白表达的影响。1 材料与方法
1.1 药品与试剂 双参通脉颗粒(ginseng and salvia granules for promoting blood flow,GSG)为辽宁中医药大学附属医院院内制剂,合心爽(盐酸地尔硫卓片,diltiazem hydrochloride,DH)购自天津田边制药有限公司,IL-1β检测试剂盒、IL-6检测试剂盒、TNF-α检测试剂盒购自凯基生物有限公司,NF-κBp65抗体购自美国Cell Signaling公司。
1.2 实验仪器 5234R型高速离心机(德国Eppdendorf公司),BB23型培养箱(美国PE公司),ROTEAN电泳系统(美国Bio公司),冰冻切片机OM3123型(瑞典Bio公司),恒温恒湿箱(上海科技生物公司),Leica图像分析仪(德国Leica公司)。
1.3 心肌缺血模型的复制 SD大鼠40只,2.5%戊巴比妥腹腔内注射麻醉,成功后,取大鼠仰卧位固定于手术台上,气管切开插管,小动物呼吸机辅助呼吸,调节参数:频率85次/min、潮气量18 mL、呼吸比1∶1,于术中记录Ⅱ导联心电图。颈部、心前区剪毛,碘伏消毒术野,心前区胸骨左侧第3肋间切口,逐层钝性分离皮下组织,沿肋间剪开肌肉,分离肋骨 ......
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