病毒性心肌炎属于心血管系统疾病，临床表现无明显特异性，大部分病人病情较轻，有一部分逐渐发展为慢性心肌炎，或因长期得不到治疗病毒发生病理免疫反应，发展为扩张型心肌病[1]。目前研究认为由病毒侵入所导致的心肌组织炎症反应是病毒性心肌炎病情加重的重要原因[2-3]。阿那白滞素属于重组人白介素-1受体拮抗剂，在类风湿性关节炎治疗中应用广泛。国外最新研究显示阿那白滞素可用于心肌炎治疗，且抑制炎症反应效果较好，国内关于阿那白滞素治疗心肌炎方面的报道较少[4]。本研究通过制备病毒性心肌炎小鼠模型，给予阿那白滞素干预，旨在探究阿那白滞素对心肌的保护作用以及对Toll样受体4(TLR4)与肿瘤坏死因子受体活化因子6(TRAF6)信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及实验病毒 4周龄无特定病原体(SPF)清洁级雄性BALB/c小鼠40只，体重(18.64±2.18)g，由广东省农业科学院动物卫生研究所提供，合格证书为：SYXK(粤)2016-0315，所有小鼠均在25 ℃、湿度为80%的环境中统一喂养，严格按照SPF级动物饲养要求进行饲养。柯萨奇病毒B3(coxsackie virus B3，CVB3)由南方医科大学病原微生物实验室惠赠，该病毒已在Hela细胞上传代，经过反复冻融3次后测定半数组织感染剂量为10-3/L。

    1.2 实验试剂与仪器 阿那白滞素(湖北荆州市天济药业有限公司；生产批号：20160930；规格：每片0.3 g)；心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)检测试剂盒购自上海生物工程有限公司；兔抗鼠TLR4、TRAF6、核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)、髓样分化蛋白88(myeloid differentiation protein 88，MyD88)、TIR结构域接头分子(TIR domain junction molecule，TRIF)单克隆抗体购于美国Gibco公司；二抗辣根过氧化物酶标记山羊抗兔二体购于美国R&D公司；伊红、苏木素购于美国Sigma公司；ABC试剂盒购于美国Vector公司；2×SYBR Premix Ex Taq II购于宝生物工程(大连)有限公司；RNA提取和反转录试剂盒均购自北京天根生化科技有限公司；胎牛血清、α-MEM培养基购于美国Gibco公司；胰蛋白酶购于美国Amresco公司；CO2培养箱购于Forma Scientific公司 ......