哈巴苷对H2O2诱导的大鼠心肌细胞H9c2氧化应激损伤的保护作用
货号,1材料与方法,2结果,3讨论
心血管疾病是导致人类死亡的主要原因之一,也是导致我国病人猝死的主要原因[1]。随着人们生活水平的提高,心血管疾病的发病率和致死率也呈逐年上升趋势[2-3]。心肌缺血、高血压、高血脂、糖尿病及过度疲劳均是导致心血管疾病的重要因素[4]。近年来大量研究表明,氧化应激诱导的心肌细胞凋亡在心血管疾病发展过程中发挥着重要作用[2, 5]。心肌细胞是一类高度分化的细胞,心肌细胞的凋亡会导致心脏功能减退,最终导致心脏功能衰竭[6]。因此,寻找新的药物抑制氧化应激、减少心肌细胞凋亡是目前心血管疾病治疗研究的热点。白毛夏枯草是我国常用中草药,常用于治疗风湿病、关节炎、胃肠道功能紊乱等疾病,具有较强的抗炎活性[6]。哈巴苷(harpagide, HG) 是白毛夏枯草的主要活性成分,近年来研究表明哈巴苷也具有抗炎活性[7],并且还能对抗谷氨酸盐诱导的氧化应激损伤,从而抑制大鼠大脑皮层神经细胞的凋亡[8]。但其对心肌细胞氧化应激的作用还少见报道。本研究采用H2O2处理心肌细胞H9c2,诱导心肌细胞氧化损伤,以研究哈巴苷对心肌细胞氧化应激的作用。1 材料与方法
1.1 主要试剂 哈巴苷 (货号:6926-080-5) 购自上海一研生物科技有限公司,分子式为C15H24O10,分子量为364.35,纯度≥98%。DMEM/F12培养液 (货号:11330032)、胰酶 (货号:25200114) 和胎牛血清 (货号:12483020) 购自美国Invitrogen公司,Hoechst 33256染色液 (货号:C1027)、RIPA裂解液 (货号:P0013C) 和BCA试剂盒 (货号:P0010) 购自上海碧云天生物科技公司。超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD,货号:A001-3)、丙二醛 (malondiadehyde, MDA,货号:A003-1)和谷胱甘肽 (glutathione, GSH)试剂盒 (货号:A006-1) 购自南京建成生物工程研究所。Caspase-3(货号:ab13847)、Caspase-9(货号:ab32539)、Bcl-2 (货号:ab182858) 和Bax (货号:ab32503) 一抗和山羊抗兔二抗(货号:ab6721)均购自英国Abcam公司 ......
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