涂 悦

    脑梗死作为临床常见的一种脑血管病，其较高的致残率和致死率给病人及社会带来了沉重负担。而脑梗死后继发的脑水肿是致残和致死的重要原因之一，因此有效的控制脑水肿是治疗脑梗死的关键[1]。有研究表明，十二井穴放血疗法对改善脑梗死后脑水肿有一定疗效，但相关机制仍未阐明[2]。端粒是染色体末端的一段非编码重复序列，其随年龄增加及氧化应激、炎症等因素的累积而不断缩短，当缩短到一定程度时则会造成细胞凋亡，加重脑损伤[3]。这提示端粒可能是十二井穴放血疗法发挥脑保护作用的靶点之一。本实验通过构建脑缺血再灌注小鼠模型，以探讨十二井穴放血疗法对脑水肿的影响，同时进一步检测端粒长度和端粒生物合成的相关基因表达，从而为挖掘十二井穴放血疗法治疗脑梗死的机制提供更多的基础支持。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物、试剂及仪器 C57BL雄性小鼠36只，30～35 g，购自天津医科大学动物实验中心。RNA/DNA共提取试剂盒(北京天根公司)，cDNA第一链合成试剂盒(北京天根公司)，实时荧光定量试剂盒(北京天根公司)，real-time PCR仪(StepOne Plus，美国ABI公司)，小动物麻醉机(深圳瑞沃德公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 动物分组及模型的构建 将小鼠随机分为3组，即对照组、大脑中动脉栓塞组(MCAO组)和井穴放血组，每组12只。MCAO组和井穴放血组采用线栓法构建大脑中动脉栓塞模型：以400 mL/min的3%异氟烷诱导麻醉 ......