清营汤对病毒性心肌炎小鼠炎性因子水平和IGF-1表达的影响
心肌细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
崔利萍,崔艳花2,刘晓东3,周 丽,刘玉洁病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是由嗜心肌病毒感染心肌引起的心肌炎症性疾病,以心肌细胞变形及坏死或间质性炎症为主要特征,位于儿科心肌炎的首位,发病率呈逐年上升趋势[1]。肠道柯萨奇病毒B(CVB)是引起病毒性心肌炎的主要病原,流行病学研究显示,病毒性心肌炎病人常有近期CVB 感染[2]。病毒性心肌炎尚无有效且系统的治疗方法,逐步引起了医务人员的重视。经典方剂清营汤具有清营解毒、滋阴透热之功效,现代常用于乙型脑炎、流行性脑脊髓膜炎、脓毒症等急性感染性疾病[3]。本研究通过柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠建立病毒性心肌炎模型,探讨清营汤对病毒性心肌炎小鼠死亡率、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及心肌组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、IGF-1受体(IGF-1R)表达的影响,为临床防治病毒性心肌炎提供一定的实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 60只近交系BALB/c 雄性小鼠,4周龄,体重16~18 g,购于河南省实验动物中心。
1.2 实验药物 清营汤:水牛角30 g,生地黄15 g,玄参9 g,竹叶3 g,麦冬9 g,丹参6 g,黄连5 g,金银花9 g,连翘6 g。按方剂比例称取药材适量,加10倍量70%乙醇加热回流提取2次,每次2 h,过滤,合并滤液,减压回收乙醇,调整浓度为相当于生药1.05 g/mL。
1.3 主要试剂与仪器 CVB3病毒液由郑州大学微生物与免疫学教研室惠赠,病毒液组织培养半数感染量为100 TCID50/0.1 mL;CK-MB、AST、LDH、IL-6、IL-10、TNF-α 酶联免疫吸附实验(ELISA)测定试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司;IGF-1、IGF-1R单克隆抗体购自Santa Cruz公司;ELX-800型酶标仪(美国BIO-TEK公司);T10型高速组织匀浆机(德国IKA公司);RM2245型病理切片机(德国Leica公司);CX31型显微镜(日本Olympus公司) ......
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