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    偏头痛是一种常见的、高度致残的原发性头痛，和较高的社会经济负担相关，并具有很高的患病率[1]，被世界卫生组织列为第六大致残疾病[2]。研究显示，每年有2.5%左右的头痛病人会发展为慢性偏头痛[3]，其中约38%的慢性偏头痛病人需要采用预防性治疗[4]。偏头痛虽然不能治愈，但大量的研究证实规范的预防治疗可以明显地降低偏头痛病人的发作频率，减轻发作程度，减少功能损害，提高生存质量，减轻病人的经济负担[5-6]。但有研究显示，目前偏头痛的治疗普遍不足，仅有约20%的人接受过预防性的治疗[7]，其中超过25%的偏头痛病人适合预防性治疗，然而可能从中获益的病人中有相当一部分没有得到过预防性治疗[3]。我国从古就重视预防治疗，如《黄帝内经·素问》：“上工治其萌芽……下工救其已成， 救其已败。”从社会现状和病情需要来看，采用中药治疗偏头痛有重要意义。本课题组前期研究了采用芎芷地龙汤1 d、3 d、7 d预防给药对偏头痛模型痛阈及血管活性物质的影响[8]，为深入探讨芎芷地龙汤对偏头痛的预防治疗机制，本实验拟观察芎芷地龙汤不同时间点预防给药后，三叉神经血管系统中三级神经元中CREB1a、CREB1b mRNA表达情况。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体动物(SPF级)成年雄性SD大鼠，体重(200±20)g，由维通利华实验动物技术有限公司生产。动物许可证号：SCXK(京)2012-0001。

    1.2 药品与试剂 芎芷地龙汤(川芎、白芷、生石膏、地龙、元胡)由北京中医药大学东方医院制剂室提取，每毫升含生药2.0 g；硝酸甘油注射液(5 mg/mL)购于北京益民药业有限公司；琥珀酸舒马普坦片，每片25 mg，购于海南先声药业有限公司；异丙醇(无锡市化学试剂厂生产)；焦碳酸二乙酯(DEPC)，北京欣经科生物技术有限公司生产；三氯甲烷(氯仿)，由北京化工厂生产；TRIZOL Reagent(Invitrogen)；High Pure RNA Tissue Kit(Roche REF12033674001)；Go Taq 2-Step RT-qPCRsystem(Promega A6010)；Go TaqqPCR Master Mix(Promega A6002)。

    1.3 实验仪器 电动手持匀浆器(KONTES)；PCR仪(Bio-RAD CFX96 Real-Time System)；三用电子恒温水箱(SHH.W21 ......