心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury，MIRI)是指心肌缺血后重新获得血液灌注而引起的，以心律失常、心肌顿抑、心肌梗死面积扩大等为主要表现的功能障碍及结构损伤性疾病[1]。MIRI好发于冠状动脉支架植入手术、急性心肌梗死溶栓等治疗后，是制约心血管阻塞性疾病再通后疗效的主要因素之一[2]。近年来，随着生活水平改变和人口老龄化进展，我国心血管疾病的发生率不断增加，据统计，我国目前约有2.9亿心血管疾病病人，死亡率占死亡构成的40%以上[3]，高于肿瘤及其他疾病，居于首位。使缺血的心肌尽快恢复灌注是治疗心血管疾病的主要方向，但MIRI的存在又严重影响治疗效果，故采取措施减轻MIRI对于心血管疾病的治疗有重要意义。目前，临床上对于MIRI仍无特效治疗方案，有研究认为，阿片类药物对于器官缺血再灌注损伤有明确的保护作用[4]。舒芬太尼是临床常用的阿片类麻醉剂之一，也可以拮抗MIRI[5]，但具体的作用机制尚未完全明确。本研究探讨舒芬太尼对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin-1表达的影响，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 6～7周龄SPF级健康雄性SD大鼠52只，体重200～260(231.37±17.63)g，动物许可证号：生产许可SCXK(沪)2017-0003，由中国人民解放军第二军医大学(实验动物中心)提供。所有大鼠分笼适应性饲养，饲养室内安静、通风，温度设定为20～25 ℃，湿度控制在50%～70%，昼夜节律为12 h，大鼠自由活动并摄入标准饲料、灭菌水，定期更换垫料、清扫饲养室、消毒。

    1.1.2 主要药品与试剂 枸橼酸舒芬太尼注射液，规格：每支50 μg，批号：20170223，购自宜昌人福药业有限责任公司；3-甲基腺嘌呤(3-MA)，规格：每瓶50 mg，纯度98%，CAS号：5142-23-4，货号：Z-DLM-7471-PK-50MG，购自上海甄准生物科技有限公司。10%水合氯醛，购自成都普济医药化工有限公司；肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)酶联免疫吸附(ELISA)法试剂盒，购自齐一生物科技(上海)有限公司；RIPA组织细胞快速裂解液(含苯甲基磺酰氟)，购自北京泰泽瑞达科技有限公司；二喹啉甲酸法(BCA)法蛋白定量试剂盒，购自上海泽叶生物科技有限公司；十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE凝胶)制备试剂盒、聚偏二氟己稀膜(PVDF膜) ......