赵瑞珍赵子珺唐启盛

    血管性痴呆(vascular dementia，VD)是脑卒中后常见并发症之一，病人早期表现为近期记忆障碍，对新事物的学习能力减弱，随着病情进一步发展，远期记忆受损，一般事物的理解力和判断力变差，或出现其他精神状态改变。一项以医院人群为基础的队列研究发现，在脑卒中后3个月有17%～66%发生轻度认知障碍，其中26%～30%会在一年左右出现认知功能严重障碍，甚至发展为VD[1]。目前对于脑卒中后向VD转变的机制尚未有明确结论，近年来，国内外学者从信号通路角度对VD的发病机制进行了深入探讨，现已证实P38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)在脑卒中后病理变化和转归的过程中占有重要地位，对海马神经突触可塑性产生损伤，影响长时程增强 (long-term potentiation， LTP)这种突触可塑性形式[2]。本研究在前期研究的基础上，进一步探讨P38-MAPK信号蛋白在VD大鼠脑内的表达以及中药颐脑解郁方的干预作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级Wistar雄性大鼠体质量(200±10)g，实验动物许可证：SCXK(京)2012-0001。大鼠适应性喂养1周，温度22 ～25 ℃，相对湿度55%～65%，自由进食饮水，普通饲料饲养。

    1.2 实验药品和试剂 细胞裂解液(北京Solarbio公司)；50x蛋白酶抑制剂混合物(北京凯基生物公司)；BCA蛋白含量检测试剂盒(北京凯基生物公司)；蛋白缓冲液(北京普利莱公司)；5xTris-甘氨酸电泳缓冲液(北京Solarbio公司)；10x电转液(北京Solarbio公司)；10x封闭-洗涤缓冲液(北京 Solarbio公司)；分离胶缓冲液(北京Solarbio公司)；浓缩胶缓冲液(北京Solarbio公司)；30%双丙烯酰胺溶液(北京Solarbio公司)；PAGE胶促凝剂(北京普利莱公司)；过硫酸铵(北京普利莱公司)；封闭专用脱脂奶粉(北京普利莱公司)；Western一抗稀释液(上海Beyotime公司)；PVDF膜(北京Millipore公司)；蛋白质分子量Marker(北京Thermo公司)；内参抗体(北京博奥森公司)；P38单克隆抗体(上海Cbcam公司)；辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(北京博奥森公司)；无水甲醇(天津进丰化学)；发光剂(美国GE Healthcare)等 ......