杨小鸥，杨国伟，刘志孝，孙 静

    帕金森病(Parkinson′s disease)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病，老年人群发病率位居第二位，仅次于阿尔茨海默病[1]，其病理特征主要是中脑黑质区域致密部多巴胺能神经元变性或缺失，导致纹状体多巴胺能神经元减少及Lewy氏小体形成[2-3]。临床主要表现为静止性震颤、运动迟缓、肌肉僵硬等一系列运动功能障碍[4]。糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)是一种高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶[5]，主要依赖于其对底物的磷酸化作用，参与细胞增殖、凋亡等过程，在帕金森病发展过程中起重要作用[6-7]。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(Akt)信号转导通路是近年来发现的，参与调控细胞凋亡的一条重要信号通路，其活化后使GSK-3β失活，从而避免细胞凋亡的发生[8-9]。白藜芦醇是广泛存在于各种水果、蔬菜中的一种多酚类化合物[10]，具有抗炎、抗氧化应激及抗凋亡作用[11]，且有研究证实其通过多种途径对帕金森病等神经退行性疾病具有一定的保护作用[12]，但白藜芦醇通过PI3K/Akt/GSK-3β通路改善帕金森病的神经退行性病变报道较少。本研究探讨白藜芦醇通过PI3K/Akt/GSK-3β通路改善6-羟基多巴胺(6-OHDA)所致帕金森病小鼠神经退行性病变，从而为白藜芦醇的临床使用提供可靠依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级C57BL/6雄性小鼠，10～11周龄，体重20～25 g，购自济南朋悦实验动物繁殖有限公司，动物批号：SCXK(鲁)20170001，饲养于沈阳医科大学实验动物中心洁净动物实验室恒温恒湿SPF级条件下，高压灭菌饮用水和饲料，自由摄取。

    1.2 实验试剂 白藜芦醇购自湖南正清生物有限公司；TUNEL试剂盒购自北京碧云天生物科技有限公司；磷酸化蛋白激酶(p-Akt)鼠源单抗、磷酸化糖原合成酶激酶3(p-GSK-3β)兔源单抗、PI3K兔源单抗、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)鼠源单抗、抗兔二抗、抗鼠二抗均购自美国Cell Signaling公司；Caspase-3及内参引物由上海生工生物工程有限公司合成；实验所用其他试剂购自上海生工生物公司 ......