心房颤动大鼠心房肌HCN2、HCN4表达及青山健心片的干预作用
洛尔,批号,1材料与方法,2结果,3讨论
焦华琛,郑书敏,李运伦,高金超,张辛欣,钟 霞超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel,HCN)是一类新近发现的由HCN1-4基因家族编码的离子通道[1]。HCN通道由4个不同的亚基构成复合体[2],参与编码超极化激活阳离子电流(If)通道结构蛋白[3],是心脏动作电位缓慢舒张期自动去极化的重要部分,具有调控心脏起搏的功能。前期研究显示,If与心房颤动的发生及维持关系密切[4]。本研究观察心房颤动大鼠心房肌HCN2、HCN4蛋白及其mRNA表达,以及青山健心片对两种通道蛋白的干预作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级健康雄性Wistar大鼠80只,8周龄,体重(200±20)g,由山东大学动物中心提供,动物合格证号20184897。于山东省动物中心实验动物室饲养。
1.2 药物 青山健心片购自山东中医药大学附属医院。将青蒿、常山按3∶1比例加入8倍重水两次水提,浓缩,醇沉24 h,每毫升含生药7.1 g,制成浸膏片,每片0.3 g,给药时按比例进行稀释。酒石酸美托洛尔,批号1704A13,阿斯利康制药有限公司生产,规格:每片25 mg。
1.3 主要试剂与仪器[5]RNA提取液,购自Servicebio公司,批号G3013;HyPure Molecular Biology Grade Water,购自HyClone公司,批号SH30538.02;RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit,购自Thermo公司,批号#K1622;三氯甲烷,国药集团化学试剂有限公司生产,批号10006818;异丙醇,国药集团化学试剂有限公司生产 ......
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