周乃强，姚杨玲，黄坚毅

    缺血性脑损伤属于脑血液循环障碍性疾病[1]。一般临床表现为运动障碍如偏瘫以及言语不清等，有些还会造成智力障碍[2]。FOXO3a蛋白可以调控细胞内部环境的稳定，B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)与Bax是相互对立的一对基因，与细胞凋亡之间有密切关联，对神经系统有重要作用。本研究通过检测脑缺血性大鼠FOXO3a蛋白、Bcl-2蛋白及Bax蛋白表达水平，探究其在脑缺血性大鼠中的水平变化及对大鼠神经功能和细胞自噬的影响。

    1 材料与方法

    1.1 研究动物与分组 选取20只Wistar大鼠，由广西大学动物科学技术学院提供，雌雄不限，月龄3～6(3.8±1.5)个月，体质量200～250(220±8)g。所有大鼠均养殖在清洁笼子里，室温(25.5±3.8)℃，相对湿度40%～45%，每天光照12 h，喂饮纯净水。经过1周饲养时间后，随机分为正常组和脑缺血组，其中正常组10只，脑缺血组10只。本实验获得我院实验动物伦理委员会批准。

    1.2 方法

    1.2.1 大鼠脑缺血模型的建立 采取四动脉结扎法，参照杜郭佳等[3]的方法，并作出适当改进，脑缺血组大鼠均用10%的水合氯醛进行腹腔麻醉，以俯卧体位固定在立体定向仪上，将头顶部毛发剃除并消毒后，使用高频电刀在第一颈椎横突翼的左右横突孔永久性阻断椎动脉血流，1 d后，使用动脉夹将大鼠两侧的颈总动脉夹闭，5 min后打开动脉夹，实验结束。实验后大鼠出现意识混乱、瞳孔散大、呼吸加快、无痛感以及瞳孔对光反射消失等，说明脑缺血大鼠模型建造成功，大鼠实验过程中死亡(2只)以及实验结束后造模不成功者弃用。

    1.2.2 标本采集 将待测大鼠用乙醚麻醉后，断头处死，切取脑组织70 mg，加入10倍体积的离心缓冲液，手动匀桨10 min，用离心机以2 000 r/min的转速分离 ......