戚丹凤

    心肌肥厚是由特发性心肌病、心肌梗死、肺动脉高压、心脏瓣膜病等引起的，心脏长期超负荷诱发的一种病理代偿反应[1]，以心肌细胞肥大、蛋白质含量升高、间质成分异常等为主要病理特征。心肌肥厚是多种心血管疾病的独立危险因素[2]，引起心肌收缩、舒张功能下降，长期存在发展为失代偿，可转化为心力衰竭、心源性猝死、恶性心律失常等严重疾病，极大增加病人死亡率[3]。血管紧张素转换酶抑制剂、β-受体阻滞剂、钙拮抗剂、醛固酮受体拮抗剂等是临床治疗心肌肥厚广泛使用的药物，可一定程度改善病人症状，但对降低死亡率无明显效果，且长期使用副作用明显。寻找安全有效的药物以防治和逆转心肌肥厚是目前临床研究热点。朱广旋等[4]研究发现，中药以多靶点、生物活性成分丰富的优势成为研发治疗心肌肥厚新药的主要来源。川芎嗪为中药川芎的酰胺类生物碱成分，对多种心血管疾病具有良好的防治作用[5]，但具体作用机制尚不明确。本研究观察川芎嗪对压力超负荷诱导大鼠心肌肥厚信号转导系统丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 清洁级健康雄性SD大鼠78只，体质量220～260(243.74±13.57)g，购自浙江省实验动物中心，动物许可证号：SCXK(浙)2014-0001。所有大鼠分笼饲养于动物饲养室内，每笼5只，饲养室内安静，定时通风换气，温度22～25 ℃，相对湿度为65%左右，昼夜节律为12 h，饲以充足的普通标准饲料和蒸馏水，大鼠自由活动、进食，每周更换3次垫料。

    1.1.2 实验材料、药品与试剂 川芎嗪，CAS号：1124-11-4，纯度：HPLC≥98%，货号：C-045，规格：每支20 mg，购自成都瑞芬思生物科技有限公司，使用时采用二甲基亚砜(DMSO)溶解，后采用蒸馏水稀释配制成浓度为5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL的川芎嗪溶液，现用现配；缬沙坦片(规格：每片40 mg，批号：20170325，购自常州四药制药有限公司)，使用时采用DMSO溶解，后采用蒸馏水稀释配制成浓度为2 mg/mL的缬沙坦溶液，现用现配。DMSO，购自北京智杰方远科技有限公司；磷酸缓冲盐溶液(PBS)，购自武汉巴菲尔生物技术服务有限公司；苏木精-伊红(HE)染色试剂盒，购自上海晶都生物技术有限公司；蛋白裂解液(RIPA)、苯甲基磺酰(PMSF)，购自艾美捷科技有限公司；二喹啉甲酸(BCA)法蛋白定量试剂盒、聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶试剂盒，购自北京纽朴生物技术有限公司；兔抗磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38)单克隆抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG ......