徐昌武，邱立强，夏 豪，江 洪

    心脑血管疾病是全世界因疾病造成死亡的主要原因，严重威胁人类生命健康[1]。动脉粥样硬化是冠心病和脑卒中等多种心脑血管疾病的病理基础，而血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖在动脉粥样硬化和血管狭窄中起着决定性的作用[2]。p300/CBP相关因子(PCAF)是一种转录辅激活子，具有组蛋白乙酰基转移酶活性，最新研究显示PCAF在肿瘤发生、增殖和侵袭、细胞周期调控、凋亡以及基因转录、DNA损伤后修复等细胞生命过程中发挥着重要作用[3-5]。但其在VSMCs中是否具有类似促进细胞增殖的作用却鲜有报道。为此，本研究通过构建病毒以下调PCAF的表达，观察其对大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用以及对相关信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料 SD雄性大鼠(120～150 g)购自湖北省实验动物研究中心。DMEM/F12培养基及1×磷酸缓冲盐溶液(PBS)，成分包括137 mmol/L氯化钠、2.7 nmol/L氯化钾和10 mmol/L PBS，pH 7.3～7.5，均购自美国HyClone公司；胎牛血清(FBS)购自杭州四季青公司；Ad-GFP、Ad-PCAF RNAi(含GFP)重组腺病毒购自上海吉凯基因有限公司；CCK-8细胞毒性及增殖检测试剂盒(CCK-8)购自日本株式会社同仁化学研究所；4′，6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、BCA蛋白浓度测定试剂盒、VSMCs表型标志蛋白(α-SM-actin)抗体及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体均购自碧云天生物技术研究所；丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)一抗均购自美国CST公司；羊抗兔荧光二抗购自美国LI-COR 公司；聚偏氟乙烯(PVDF)膜购自美国merck-millipore公司；脱脂奶粉购自武汉谷歌生物科技有限公司；Trizol购自南京AIDLAB公司 ......