孟胜喜，霍清萍，王 兵，付剑亮，彭文波，王宇新，梁 芳，汪天湛，张洪艳，余忠海，彭学丰，李学敏，曹健美，李文涛

    阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease，AD)属于一种严重的神经退行性病变，其主要临床表现为记忆衰退和认知障碍[1]。AD是痴呆最常见的原因，以其高发病率、高病死率成为重要的世界公共卫生问题，同时也是一种严重威胁到老年人的健康和生活质量的疾病[2-3]。随着全球人口老龄化的加剧，AD病人日益增多，尤其是在65岁以上的老年人群中，发生率可高达12%。预计到2050年，AD病人将达到11 500万人，这将极大增加社会和个人的经济负担[4-5]。中医药具有多系统、多靶点、多层次作用特点，并且毒副作用小，安全性较好，在AD的防治上有自身的特点及优势。恒清Ⅱ号方是本课题组长期用于治疗AD 的临床经验方。本实验基于尿代谢组学探讨恒清Ⅱ号方治疗AD的作用及其机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器及实验用品 Agilent1200高效液相色谱仪(美国安捷伦)；micr-OTOF-QⅡ质谱仪(德国布鲁克)； PoroShell 120EC-C18色谱柱(美国安捷伦)；SAESHIN 90+10(韩国Saeshin)；FIS13-990-16超低温冰箱(Thermoscientific)；FA1204L电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。甲酸购于CNW公司(中国上海)；甲醇、乙腈、超纯水均购于Merck(Darmstadt，Germany)公司；2-氯苯丙氨酸(DL-o-Chlorophenylalanine)购于GL Biochem (上海) Ltd.公司。

    1.2 实验药物 盐酸多奈哌齐(安理申)购自卫材(中国)药业有限公司，国药准字H20050978；批号：1705080，规格：每片5 mg。恒清Ⅱ号方组成：益智仁30 g，黄芪15 g，菟丝子10 g，川芎10 g，熟地黄15 g，桑寄生10 g，煅石决明10 g，杜仲10 g，地龙10 g，天麻10 g，钩藤10 g。由上海市第六人民医院中药房提供。按处方比例称取药材，加10倍量水浸泡0.5 h，煎煮3次，每次40 min，过滤，合并3次滤液，37 ℃水浴加热浓缩，根据临床的实际用药情况，对药液进行浓缩处理，并以中质量浓度匹配临床的实际用药浓度。中质量浓度浓缩至0.535 0 g/mL，恒清Ⅱ号方低剂量为0.267 5 g/mL，中剂量为0.535 0 g/mL，高剂量为1.070 0 g/mL，分别置于4 ℃冰箱贮存备用。

    1.3 实验动物及分组 取SPF级雄性APPswe/PS1dE9双转基因小鼠6月龄50只 ......