胰高血糖素样肽-1对脂质合成关键酶CD36、ACAT1影响的研究
激动剂,泡沫,硬化,1材料与方法,2结果,3讨论
张 奎,韩永魁,岳云飞,申晓彧巨噬细胞泡沫化是早期动脉粥样硬化病变脂纹、脂斑主要成分,减少细胞内胆固醇流入及合成、增加流出,抑制巨噬细胞泡沫化,对冠心病病人极为重要[1]。脂肪酸转位酶(CD36)、酯酰辅酶A胆固醇酰基转移酶(ACAT1)是细胞内的胆固醇合成关键酶[2-4]。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是结肠和小肠远端的L细胞分泌的胃肠激素,可刺激胰腺分泌胰岛素而发挥其降糖主要作用[5]。体内有两种生物活性形式,分别为GLP-1(7-37)和GLP-1(7-36),7-36a为7-37的酰胺化产物。GLP-1约80%的生物活性来自7-36a[6]。目前研究在人体内的GLP-1具有抗动脉粥样硬化作用,但具体机制不详[7],有证据显示体外重组GLP-1(rhGLP-1,7-36)与人体内活性GLP-1(7-36)结构及功能高度一致[8]。本研究分析GLP-1(7-36)是否可以降低巨噬细胞源性泡沫细胞CD36、ACAT1基因及蛋白表达,从而抑制细胞内胆固醇积累,减轻巨噬细胞泡沫化程度,最终抑制动脉粥样斑块的形成。
1 材料与方法
1.1 主要仪器、试剂和实验设备 主要试剂:巨噬细胞株(上海中科院细胞中心);GLP-1(7-36)(货号:249125,上海吉尔生化有限公司生产);Exendin(9-39)(货号:055285,上海吉尔生化有限公司生产);HPR标记二抗(武汉博士德生物工程有限公司);氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)(北京欣和佳源公司);ACAT1一抗(武汉三鹰生物有限公司);CD36一抗(上海拜力生物科技有限公司); RNA提取试剂 TRIzol(索莱宝公司) ......
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