樊芳芳，胡晓芸

    蛋白C系统作为人体抗凝系统的重要组成部分，在血液中以无活性的酶原形式存在，保持正常机体凝血与抗凝功能平衡[1]，是体液抗凝的主要成分之一。蛋白C系统参与抗凝的不同阶段，不仅影响蛋白C活化，而且抑制活化蛋白C活性[2-3]。Fukudome等[4]从内皮细胞表面分离出蛋白C和活化蛋白C的结合蛋白——内皮细胞蛋白C受体(endothelialcellprotein C receptor，EPCR)，其存在于细胞膜表面的跨膜蛋白，与蛋白C/活化蛋白C特异性结合后将其呈递给邻近的凝血酶/血栓调节蛋白复合物，使蛋白C活化效率提高5倍，同时参与调节血液凝固反应。EPCR有两种存在形式，一种是内皮细胞表面的膜联EPCR(mEPCR)，通过与蛋白C结合增强蛋白C/活化蛋白C活性，提高蛋白C活化率[5]，但其本身无任何直接的抗凝活性；另一种是存在于血浆的可溶性EPCR(sEPCR)，其作用是抑制蛋白C/活化蛋白C活性[5-6]。相关研究发现，血浆sEPCR升高可增加动静脉血栓形成风险[6-7]。本研究将香烟烟雾提取物(CSE)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，观察CSE对sEPCR表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂 HUVECs株为ATCC来源细胞株，购自上海门谍塔生物科技发展有限公司；胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)购自杭州四季青公司；RPMI-1640培养基、HEPES、胰蛋白酶均购自Gibco；青霉素、链霉素均购自华北制药股份有限公司；人sEPCR酶联免疫吸附法测定(ELISA)试剂盒购自上海西唐公司。

    1.2 CSE的制备 参照文献[8]方法 ......