程 飞，陈景福，李诗成，刘 静，陈丽珍，郭灼林

    糖尿病作为一种全身慢性多发性疾病，随着病情的加重，病人会出现多种慢性并发症，其中糖尿病血管病变、糖尿病性肾病和糖尿病视网膜病变是常见的严重并发症，对病人的预后和生活质量产生巨大的影响。糖尿病血管病变是心血管疾病发生的诱导因素，有相关研究指出血管内皮细胞在糖尿病血管病变过程中起着重要作用。有研究表明，高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)出现损伤，伴随细胞凋亡与糖尿病足和糖尿病视网膜病变密切相关[1]。黄芪作为一种传统的中药材，具有利水消肿、固表补气的作用，同时黄芪中包含丰富的有效单体成分，如黄酮类、皂苷类和多糖类，其中黄芪甲苷在功效方面已有较多研究，研究显示，黄芪对肾病病人尿蛋白有很好的改善作用，从而发挥保护肾功能的作用[2]。另外，黄芪甲苷具有改善脑缺血、心肌缺血和抗氧化的作用，同时还对糖尿病肾病等多种疾病具有改善作用。黄芪甲苷具有抗炎、减少氧化物产生、对抗细胞凋亡的作用[3-4]。ClC-3氯离子通道作为影响细胞容积和细胞电位的通道，对细胞的增殖、分化和凋亡等有直接的作用[5]。因此，本实验探讨ClC-3氯离子通道在高糖诱导HUVECs损伤中的分子作用以及黄芪甲苷的对抗作用及其机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器和试剂 细胞培养箱为HERA Cell 150，胎牛血清和低糖DMEM均购自BI公司；二甲基亚砜、MTT试剂盒、乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒、一氧化氮(NO)检测试剂盒、Caspase-3检测试剂盒、Annexin-Ⅴ凋亡检测试剂盒均购自碧云天生物技术有限公司；内皮型一氧化氮合酶(eNOS)酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所；HUVECs株来源于美国模式培养物保藏所；黄芪甲苷购自中国药品生物制定鉴定所 ......