李 洋，赵明镜，王保福，刘 颖，金秋硕，韩小婉，李 彤，孟 慧

    微粒(microparticles，MPs)是细胞外囊泡的一种，也被称为微囊泡，是细胞在活化或凋亡的过程中由细胞膜出芽脱落形成的直径在100～1 000 nm的小囊泡，携带来源于其母细胞的mRNA、microRNAs(miRNAs)、受体及特异性蛋白等，主要通过膜融合、内吞、配体与受体结合的方式将其携带的特异蛋白或遗传物质传递给靶细胞，影响靶细胞的功能[1-2]。研究发现，微粒能够诱导内皮功能障碍，参与血管炎症、凝血、血栓形成和钙化等病理进程，促进动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的发生发展[1，3-4]。其中白细胞微粒(leukocyte-derived microparticles，LMPs)几乎参与AS的所有病理进展，临床研究发现AS病人斑块中的微粒大部分是LMPs，而LMPs中又以巨噬细胞来源的微粒居多[5]，且泡沫细胞比正常的巨噬细胞释放更多的微粒[6]。巨噬细胞极化是巨噬细胞在不同微环境的刺激下定向分化为多种亚型的过程[7]。在AS发生发展中，巨噬细胞主要以M1型(促炎型)和M2型(抗炎型)存在，M1型和M2型巨噬细胞之间的动态平衡，不仅决定了炎症的最终转归，而且与AS斑块的稳定性和疾病的轻重程度密切相关[7-8]。那么，巨噬细胞和泡沫细胞作为AS炎症病理机制的核心环节，二者来源的微粒是否参与巨噬细胞M1型和M2型的失衡，二者作用是否有差异，尚未见文献报道。本课题组前期研究显示，颈动脉粥样硬化(CAS)人群的LMPs与巨噬细胞亚型具有一定关系，可能参与调节巨噬细胞极化。因此，本研究通过对巨噬细胞来源的微粒(macrophage-derived microparticles，M-MPs)和泡沫细胞来源的微粒(foam cell-derived microparticles，FC-MPs)诱导巨噬细胞极化进行探讨，以期为后续AS的临床与基础研究提供思路及方法。

    1 材料与方法

    1.1 材料 细胞：人单核细胞系(THP-1)细胞购于中国医学科学院协和细胞资源中心；试剂：RPMI 1640培养基(索莱宝，货号31800)、胎牛血清(FBS，GIBCO，货号10099-141C)、佛波酯(PMA，Sigma，货号P1585)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL，广州奕元，货号YB-002)、无外泌体血清(宇玫博生物，货号UR50202)、饱和油红O染色剂(索莱宝，货号G1260)、绝对计数用微球试剂盒(Beckman，货号7547053)、PKH26荧光染料(Umibio ......