人参皂苷Rb3对过氧化氢诱导心肌细胞损伤模型HIF-1α、VEGF的表达作用
空白对照,1材料与方法,2结果,3讨论
邱伯雍,魏易洪,曹 敏,毛美娇,吴 琼,周 端,汤 诺,唐靖一人参皂苷是人参的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等广泛而复杂的药理作用[1]。诸多研究表明人参皂苷对心脏相关疾病有明显改善作用[2-3]。现代药理研究结果表明,作为皂苷类成分之一的人参皂苷Rb3亦可通过激活抗氧化信号通路[4]、改善心肌缺血[5-6]、抑制细胞凋亡[7]等途径保护心肌细胞。在心血管疾病中,活性氧的产生对心肌和血管具有重要作用[8]。氧化应激状态下,活性氧可引起心肌细胞凋亡,心脏功能障碍,导致心功能下降[9]。过氧化氢(H2O2)作为氧化应激的外源性诱导因子,是研究诸多药物抗心肌氧化损伤、凋亡等的常用模型[10-12]。但人参皂苷Rb3在氧化损伤过程中对心肌细胞的作用及机制的研究报道不多。故本研究拟采用H2O2诱导心肌细胞H9c2建立氧化损伤模型,检测人参皂苷Rb3对该模型中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA表达作用,同时使用磷酯酰激醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002(LY294),探讨其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞 大鼠心肌细胞株H9c2细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。
1.2 药物与试剂 人参皂苷Rb3购自成都曼斯特生物科技有限公司,批号:MUST14072211;30%H2O2、氯仿、异丙醇、乙醇均购自国药集团化学试剂有限公司;PI3K抑制剂LY294购自碧云天生物工程有限公司;Trizol Reagent、逆转录试剂盒购自Roche公司;ROX购自Roche公司;焦碳酸乙二酯购自Sigma公司;磷酸缓冲盐溶液(PBS)购自HyClone公司 ......
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