Twinfilin-1基因对H9C2心肌细胞凋亡和增殖的影响
肌动蛋白,空白对照,质粒,1材料与方法,2结果,3讨论
艾克热木·吐尔逊心肌细胞凋亡、损伤是引起心血管功能异常及相关疾病的重要始动因素之一,其与心肌梗死、心力衰竭等多种心血管疾病关系密切[1]。Twinfilin-1(Twf-1)基因是一类细胞骨架调控蛋白,主要参与调控细胞内弹性纤维的长度与排列[2]。在心肌细胞中,细胞骨架不仅参与维持细胞形态,为细胞中细胞器的定位提供支持,并且参与细胞蛋白合成以及营养物质的运输[3-4]。目前研究表明细胞骨架在心肌梗死、心力衰竭、心肌肥厚等心血管疾病过程中发挥了重要作用。探讨心肌细胞中Twf-1基因的表达及其对心肌细胞增殖与凋亡的影响,对于明确心肌细胞凋亡机制具有重要参考价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞 H9C2心肌细胞购于ATCC(American type culture collection)。
1.1.2 主要试剂 DMEM/F12培养基、胰蛋白酶、胎牛血清(GIBCO公司),TRIZOL、转染试剂质体LTX、PI(Invitrogen公司),磷酸缓冲盐溶液(PBS)缓冲液(Sigma公司),SYBR Premix Ex Taq(TAKARA公司),CCK8试剂盒(同仁)。Twf-1 RNAi慢病毒、pCXN2-Flag空质粒及 pCXN2-Flag-h Twf-1 过表达质粒均由深圳华大基因化学技术有限公司合成。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 将H9C2 细胞置于含10%胎牛血清FBS的DMEM/F12培养基中 ......
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