谭媖子，刘彩霞，朱秋燕，邓常清

    近年来，心血管疾病发病率及死亡率逐年升高[1]，且已成为威胁国民健康的头号杀手[2]。血管内皮细胞(vascular endothelial cells，VEC)损伤是多种心血管疾病的起始及关键环节，正常状态下VEC具有心血管系统屏障功能，且能合成并分泌多种生物活性物质，具有抗血栓、调节血管舒缩活动并抑制细胞迁移与趋化等功能[3]，在调节心血管系统稳态方面发挥了重要的作用[4]。因此，保护VEC免受各种理化因素的损伤，修复与改善VEC功能对心血管疾病防治具有重要的临床意义。有研究发现，氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)是引起VEC形态和功能损伤的重要因子[5]，ox-LDL具有强烈的细胞毒性，通过氧化应激直接损伤VEC形态，增加内皮细胞间隙，改变血管通透性；ox-LDL还通过抑制一氧化氮(NO)及其合成酶表达，增加活性氧产生，引起VEC功能障碍[6-7]。因此，改善氧化应激引起的VEC形态损伤及功能紊乱对治疗心血管疾病具有重要意义。

    黄芪和当归配伍具有益气补血活血的功效，有研究发现，黄芪、当归配伍不仅可促进造血，而且对心血管具有保护作用，如黄芪、当归配伍可促进内皮细胞增殖、抗氧化、抑制细胞凋亡等[8-9]。本课题组前期研究表明，黄芪和当归配伍可抑制血管内膜增生，改善局部血管炎性反应，减轻细胞外基质在血管壁沉积，抑制血管平滑肌细胞表型转化和增殖[10-11]。由于VEC损伤是血管内膜增生的起始环节，推测黄芪、当归配伍对VEC氧化损伤可能具有保护作用。药物成分“敲出/敲入”是借鉴“基因诊断治疗”以“谱-效”及“量-效”关系为切入点，采用中药目标成分“敲出/敲入”研究模式。该研究模式以中药整体为出发点，始终关联药效，注重中药多组分的整合作用，可快速、准确地辨识关键的药效物质[12]。因此，本研究采用VEC氧化损伤模型，观察黄芪、当归主要活性成分黄芪甲苷、黄芪皂苷-Ⅰ、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、阿魏及芒柄花素配伍抗VEC氧化损伤的作用，运用药物成分“敲出/敲入”中药组分辨识模式，分析其主要药效成分，明确主要活性成分对VEC氧化损伤的作用，为黄芪-当归配伍用于VEC的保护治疗提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞 实验细胞株为人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)，购自上海中侨新舟生物科技公司(批号：19195)，鉴定含有因子Ⅷ相关抗原(ⅧR：Ag)表达阳性 ......