张明磊，杨清泉，李贞彩，王 星，张一帆

    急性心肌梗死是临床常见的一种心血管疾病，心肌缺氧、缺血可引发心肌炎等病理变化，氧自由基生成量增加可造成心肌损伤，还可破坏心血管结构及功能，同时氧化应激反应还可促进心肌细胞凋亡从而造成心肌细胞损伤[1-2]。因此，抑制氧化应激反应有助于保护心肌组织及避免心肌损伤，从而降低急性心肌梗死等心血管疾病发生率。过氧化氢(H2O2)可促进心肌细胞凋亡而诱导心肌细胞氧化损伤[3]。研究表明，长链非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNA)可调控H2O2诱导的心肌细胞凋亡过程[4]。长链非编码RNA ENST00000418539.1(LncRNA ENST00000418539.1)在稳定性冠心病病人单核细胞中表达上调，并可能作为稳定性冠心病诊断的潜在指标[5]。通过生物信息学分析显示，微小RNA-24(microRNA-24，miR-24)可能是ENST00000418539.1的靶基因，研究表明，miR-24在H2O2诱导的心肌细胞中表达下调，并可能参与心肌细胞损伤过程[6]。但ENST00000418539.1是否可通过调控miR-24的表达影响H2O2诱导心肌细胞氧化应激损伤尚未可知。因此，本研究采用H2O2诱导心肌细胞建立细胞损伤，探讨ENST00000418539.1对心肌细胞凋亡及氧化应激的影响，探究其对miR-24的调控作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 大鼠心肌细胞H9c2购自中国科学院上海细胞库。H2O2购自河北健宁药业有限公司；杜氏改良培养基(DMEM)、胎牛血清、胰蛋白酶购自美国Gibco公司；Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司；Trizol试剂购自北京全式金生物技术有限公司；反转录与实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)试剂盒购自美国Thermo Fisher公司；ENST00000418539.1小分子干扰RNA(si-ENST00000418539.1)、乱序无意义阴性序列(si-NC)、miR-24寡核苷酸模拟物(miR-24 mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、miR-24特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-24)及阴性对照(anti-miR-NC)购自广州锐博生物科技有限公司；丙二醛(malondialdehyde ......