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编号:213099
硒甲基硒代半胱氨酸对神经母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响
http://www.100md.com 2021年5月25日 中西医结合心脑血管病杂志 2021年第9期
培养箱,细胞周期,空白对照,1材料与方法,2结果,3讨论
     刘慧纯,王从平,刘群会,李文静,贾 敏

    神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)起源于原始神经嵴细胞,是儿童最常见的颅外恶性实体肿瘤之一,其发病率在所有儿童恶性肿瘤中占6%~10%[1]。NB初发症状不典型,难以获得早期诊断,预后较差[2]。手术是NB的主要治疗方式,但目前单纯手术已不能满足治疗需要,大多数患儿还须给予辅助化疗,但其毒副作用大,容易产生耐受性,效果欠佳[3]。因此,寻找靶向性强、毒副作用小的化疗药物十分关键。硒甲基硒代半胱氨酸(Se-methylselenocysteine,MSC)是硒代半胱氨酸的甲基化衍生物,属于天然有机砷化物之一,具有补硒、抗氧化、抗衰老及治疗心脑血管等疾病的作用[4]。近期研究发现其对乳腺癌和肝癌等多种恶性肿瘤均有抑制作用,具有一定抗癌潜能[5-7]。但在NB中研究较少。本研究选取两种NB细胞株(SH-SY5Y和SK-N-DZ)进行体外培养,并用MSC进行干预,观察MSC对NB细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制,为NB患儿新药研究提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料及仪器 人NB细胞株(SH-SY5Y和SK-N-DZ)均购自美国ATCC细胞库,DMEM培养基和胎牛血清均购自美国Gibico公司,CCK-8试剂盒购自日本Dojindo公司,PE-膜联蛋白-V(AnnexinV-PE)/7-氨基放线菌素-D(7-AAD)细胞凋亡检测试剂盒和细胞周期检测试剂盒购自美国BD公司,BCA蛋白提取试剂盒和BCA蛋白定量试剂盒购自美国Sigma公司,半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-8、caspase-9蛋白、β-actin单克隆抗体及辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记羊抗兔二抗均购自美国Abcam公司,ECL发光盒和聚偏二氟乙烯(PVDF)膜购自美国Millipore公司。Elx808 IU-PC酶标仪购自美国BioTek公司 ......

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