伊伐布雷定对病毒性心肌炎大鼠Bcl-2基因启动子区甲基化及mRNA表达的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
陈小霞,程齐尧,詹 磊,蒋 磊心肌炎是心肌局限性、弥漫性的急性、慢性炎性病变,可由多种因素诱导发病,分为非感染性心肌炎和感染性心肌炎,病毒感染是常见的病因,其次是细菌、真菌、病原体等[1]。病毒性心肌炎是指病毒侵犯心肌组织引起急性、慢性心肌炎性病变,其中柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)是诱发病毒性心肌炎的常见病毒,占30%~50%,病毒侵犯对心肌组织造成直接损伤,引起心肌细胞变性和坏死,影响心肌组织功能[2]。病毒性心肌炎目前尚无特异性治疗方案,主要采取对症治疗,包括抗病毒治疗、免疫治疗、强心和利尿治疗等,以减轻心脏负荷为治疗原则[3]。临床常用的β-受体阻滞剂可帮助病毒性心肌炎病人减慢心率,以达到改善病毒性心肌炎病人预后,但β-受体阻滞剂可产生负性肌力作用和抑制传导系统,使用过程中可能加重病人心功能损伤[4]。伊伐布雷定属于选择性、特异性窦房结If通道阻滞剂,降低心律同时不影响心肌收缩力和心脏的传导能力,2015年已在我国获批上市用于心力衰竭的治疗[5]。相关研究表明,伊伐布雷定在冠心病[6]、心力衰竭[7]、心绞痛[8]等疾病中表现出心脏保护作用,有研究表明,伊伐布雷定治疗病毒性心肌炎患儿的临床疗效显著[9],但伊伐布雷定治疗病毒性心肌炎的作用机制尚未明确。本研究通过制备病毒性心肌炎大鼠模型探讨伊伐布雷定对病毒性心肌炎作用机制,以期为临床治疗病毒性心肌炎提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级雄性SD大鼠75只,体质量(160±10)g,购自广州中医药大学[SCXK(粤)2019-0047],购回后于SPF级环境饲养,饲养室温度20~25 ℃,湿度50%~55%,昼/夜各12 h,全天自由饮水、进食。本实验通过我院动物伦理委员会批准,遵守“3R”原则。
1.2 实验试剂及仪器
1.2.1 实验试剂 CVB3(武汉大学病毒研究所),伊伐布雷定(YJ-26039R,上海雅吉生物科技有限公司),肌红蛋白(Mb)试剂盒(0-027530,上海江莱生物科技有限公司),肌酸激酶同工酶(CK-MB)试剂盒(QY-BM11392,上海乔羽生物科技有限公司),心肌肌钙蛋白I(cTnI)试剂盒(BS-E12272R1,广州徕智生物科技有限公司),乳酸脱氢酶(lactate dehydro-genase,LDH)活力检测试剂盒(XFE1020,上海信帆生物科技有限公司),RNAprep pure细胞试剂盒与Reverse Transcriptase Kit(天根生化科技北京有限公司) ......
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