李海洲，张 琳，王 瑾，郭玉梅，张金盈

    川崎病多发生于5岁以下儿童，是一种以全身血管炎症为主要病理特征的急性发热性、出疹性自身免疫性疾病，临床表现为持续发热、皮肤出疹、黏膜充血、淋巴结肿大、手足水肿等[1]。川崎病除引起冠状动脉病变外，也可引起心肌损伤，50%～70%的川崎病患儿存在心肌炎或心肌损伤，导致部分川崎病患儿心脏收缩和舒张功能异常，严重危害生命健康，是后天性心脏病的主要病因[2]。川崎病发病机制尚不明确，临床研究显示，川崎病的发生与感染引起自身免疫功能异常有关[3]。微小RNA(miRNA)是一种非编码的小分子RNA，参与细胞增殖、分化及凋亡等多种生物学过程，miRNA表达异常与多种心血管疾病有关，川崎病患儿存在血清多种miRNA异常表达，通过调控下游靶基因，参与川崎病发生、发展过程，探讨川崎病发病过程中异常表达的miRNA可能为治疗川崎病提供新思路和新方法[4-5]。miR-155是一种多功能miRNA，在多种肿瘤组织异常表达，且与机体免疫关系密切，参与炎症介导、T细胞分化等过程，与多种自身免疫性疾病有关[6]。miR-155在川崎病心肌损伤中的作用机制尚不明确，本研究通过建立川崎病幼鼠模型，探讨miR-155对川崎病心肌损伤的影响及可能机制，寻求川崎病治疗的分子标志物，旨在为临床治疗川崎病提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物、菌种 无特定病原体(SPF)级BALB/C雄性小鼠40只，4周龄，体质量(15.30±1.50)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2016-0001。小鼠饲养于清洁通风环境，温度(23±2)℃，湿度(50±5)%，明暗周期12 h/12 h循环标准，适应性饲养1周。干酪乳杆菌干菌种购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

    1.1.2 实验试剂和仪器 含有miR-155抑制序列(miR-155-inhibitor)和无义随机序列(miR-155-inhibitor-NC)的pcDNA3.1质粒(上海吉玛制药技术有限公司)，LipofectamineTM2000试剂盒(美国Invitrogen公司)，小鼠CD4+T细胞分离试剂盒(德国Miltenyi公司)，小鼠心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(上海通蔚生物科技有限公司) ......