白天山，李志榕，黄 平，徐 烨，柳文华

    近年来，伴随着人们生活节奏加快和生活压力增加，抑郁症已成为临床常见的情感障碍类精神疾病，严重影响人们的日常生活和身心健康[1]。研究显示，雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)与抑郁、癫痫、阿尔茨海默病等多种神经系统疾病有关[2]，磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)及蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)为mTOR上游中最主要的调控蛋白，并且提高PI3K/Akt/mTOR信号通路中Akt活性，可以有效地防止神经元程序性死亡[3-4]。文拉法辛(Wenfalasin)为5-羟色胺(5-HT)及去甲肾上腺素(NE)再摄取双重抑制药，是一种临床常用新型抗抑郁药物，目前对于其抗抑郁作用机制尚未完全阐明[5]。本研究拟建立孤养结合慢性刺激(CUMS)抑郁大鼠模型，观察文拉法辛对抑郁大鼠抑郁症状的改善作用效果及对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响，以期阐明文拉法辛抗抑郁的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物 无特定病原体(SPF)级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，7～8周龄，体质量 200～225 g，购自北京维通利华生物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2018-2-006。

    1.2 药品与试剂 盐酸文拉法辛片(批号：100203)，规格：每片25 mg，购自常州四药制药有限公司。白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)酶联免疫吸附实验(ELISA)测定试剂盒购自美国R&D公司。兔抗鼠PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)单克隆抗体购自美国Abcam公司，mTOR及磷酸化mTOR(p-mTOR)单克隆抗体购自美国Cell Signaling Technology公司，β-actin内参及二抗购自北京中杉金桥生物有限公司。

    1.3 仪器 RIPA裂解液及BCA试剂盒购自美国Thermo公司；Morris水迷宫购自西班牙Panlab公司；组织切片机购自美国Thermo公司；BIO-R40型电泳槽及Kodak2000MM型电泳凝胶成像分析系统购自美国Bio-Rad公司；CX23光学显微镜购自日本Olympus公司；Eoipse Ti-s型倒置显微镜购自日本尼康公司 ......