依达拉奉对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织Caspase-3和HIF-1α表达的影响
神经细胞,阳性细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
王转转,阴怀清2,师 睿缺氧缺血性脑病(HIE)是一种新生儿常见的脑损伤疾病,死亡率高,易长期致残如智力低下、脑瘫、癫痫发作和学习障碍[1],严重者造成极大的家庭、社会负担,临床上对该病缺乏有效的治疗。依达拉奉在神经系统疾病中发挥重要作用,被认为是治疗脑梗死等缺血性疾病有效的药物,但依达拉奉是否可应用于治疗新生儿HIE尚少见报道。因此,本实验通过建立缺氧缺血性脑损伤模型,观察依达拉奉干预后脑组织中神经细胞凋亡半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的变化,探讨依达拉奉脑保护的可能机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料与分组 由山西医科大学实验中心提供7日龄SD新生大鼠108只,雌雄不限,平均体质量15 g。随机分为A组、B组、C组,每组36只。各组再根据处死时间6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d分为6个亚组,每个亚组6只。
1.2 试剂与药品的配制 一抗(兔抗鼠HIF-1α、Caspase-3)和二抗(即用型SABC试剂盒)及原位末端标记法(TUNEL)细胞凋亡试剂盒(购自武汉博士德生物技术有限公司)。规格5 mL/10 mg的依达拉奉注射液,用生理盐水(体积比1∶4)稀释为0.3 mg/L。
1.3 缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型制备与干预方法 参照Rice等[2]方法制备HIBD模型。A组为假手术组,动物只切开颈部皮肤并游离出左颈总动脉后直接缝合皮肤,不进行结扎和缺氧处理;B组为HIBD模型组;C组在HIBD模型的基础上给予腹腔注射依达拉奉4 mg/kg ......
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