李雪晶，牛玉秋，吕斯琦

    脑卒中是导致人类残疾死亡的常见病，脑卒中的首选治疗方式为溶栓，但缺血区恢复血供常造成二次损伤，病人痊愈后仍伴有严重神经功能障碍[1]。其机制可能为脑缺血再灌注造成中枢神经系统损伤，导致神经元凋亡。神经细胞损伤同时激活人体神经元再生功能[2]。成年动物脑中，前脑管膜下区(SVZ)和海马齿状回颗粒层下区(SGZ)是神经再生的发生区。生理条件下，成年动物齿状回SGZ的新生神经元迁移至齿状颗粒层分化成熟，SVZ迁移至嗅球。病理情况下，新生神经元除了正常迁移外，可向脑损伤部位发生迁移，并与损伤部位神经元有效整合。因此，神经元再生是恢复神经功能障碍和学习认知损伤的重要途径[3]。有研究显示，白芍总苷在改善神经退行性疾病具有重要的药理作用[4]。本研究采用中动脉脑缺血再灌注(MCAO)模型探讨白芍总苷改善大鼠缺血区神经元再生的保护作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与给药 将40只无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠(辽宁中医药大学实验动物中心提供)适应性喂养1周后，进行中动脉缺血再灌注造模，造模后随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注组(MCAO组)、白芍总苷组(TGP200mg/kg)、白芍总苷+抑制剂组(TGP+PD173074 组，TGP 200 mg/kg+PD173074 2 mg/kg)，每组10只。连续灌胃14 d给予白芍总苷，腹腔注射抑制剂PD173074，Sham组与MCAO组给予等量生理盐水，期间进行行为学训练与测定。MCAO组与TGP组部分大鼠处死前3 d连续腹腔注射50 mg/kg的 5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)用于免疫荧光染色中标记分裂细胞。

    1.2 实验材料 圆头尼龙线栓(广州佳灵生物公司)；异氟烷(北京一品制药公司)；2，3，5-三苯基四唑氯铵(TTC溶液，广州鸿洲科技公司)；白芍总苷(西安开来生物科技公司)；PD173074(阿拉丁生物公司)；BrdU标记物(美国Sigma公司)；血管内皮生长因子(VEGF)抗体、神经元核抗原抗体(NeuN)、双皮质素(DCX)抗体、BrdU抗体(美国Abcam公司)；脑源神经元营养因子(BDNF)抗体，细胞质膜微囊蛋白-1(Caveolin-1)抗体，β-肌动蛋白(β-actin)抗体(武汉三鹰生物公司)；2，2-联喹啉-4，4-二甲酸二钠(BCA)蛋白定量试剂盒、放射免疫沉淀(RIPA)裂解液(上海碧云天生物公司) ......