李 艺，唐启盛，王 戈，赵瑞珍

    广泛性焦虑障碍(generalized anxiety disorder，GAD)是以缺乏明确对象和具体内容的持续而明显的紧张不安，并以伴有自主神经功能兴奋和过分警觉为特征的慢性焦虑障碍，为焦虑障碍最常见的亚型之一[1]。随着现代社会的快速发展，工作、生活压力越来越大，GAD的发病率呈逐年上升趋势[2]。神经营养因子(neurotrophic factors，NTFs)主要由神经元、神经支配的靶组织和胶质细胞合成并分泌，能有效营养和保护中枢和外周神经，促进神经元的分化、生长和存活，神经营养因子及其相关的受体在神经系统正常生理功能的维持和病理状态下的修复与再生中扮演着重要角色。Papez环路是多种精神情感障碍的病理学结构基础。脑内神经营养因子在GAD发病与修复中的作用目前尚未阐明，通过病理学、细胞学和分子生物学等实验手段研究发现，GAD大鼠Papez环路区域内(包括海马、乳头体、杏仁核复合体、丘脑前核等部位)存在着广泛的细胞损伤、凋亡与坏死，而机体自身进行的神经修复与再生需要包含多种神经营养因子及其受体在内的局部微环境的营养与调控[3-4]。因此，本实验从神经修复的角度出发，采用天敌暴露饮水冲突刺激法建立GAD大鼠模型，通过免疫组织化学方法检测GAD大鼠脑Papez环路区域内海马(包括CA1、CA2、CA3、DG区)、杏仁核和丘脑前核等部位神经营养因子[脑源性神经营养因子(BDNF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、神经生长因子(NGF)]及脑源性神经营养因子受体(TrkB)、碱性成纤维生长因子受体(bFGFR)的表达水平以及丹栀逍遥散的干预效用，以期进一步揭示神经营养因子及其受体在GAD发病与修复中的作用以及疏肝清热健脾法对GAD中枢神经修复的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠，体质量(200±10)g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2012-0001。大鼠购入后，适应性饲养1周，自由摄食饮水。明暗光照各12 h，室温(20±2)℃，相对湿度50%～60%，保持安静。

    1.1.2 实验药物 中药丹栀逍遥散(柴胡15 g、栀子10 g、牡丹皮10 g、炒白术15 g等)由北京中医药大学第三附属医院提供，按灌胃剂量煎药浓缩，浓度为1.05 g/mL，贮存于4 ℃冰箱中备用，临用前加热。盐酸丁螺环酮片(西南合成药业股份有限公司生产，国药准字H19990302)按照成人用量的7倍计算大鼠用量为每天2 mg/kg ......