王彦平，张保朝，闻公灵，刘义锋，汪 宁，孙 军，茹 睿

    脑梗死是因脑部血液循环障碍引起的局限性脑组织缺血、坏死或软化，可引起颅内高压、脑疝、昏迷，严重者可致死亡[1]。随着溶栓及介入治疗的不断发展，脑梗死的死亡率下降，但多数病人仍遗留不同程度的认知功能障碍、失语、偏瘫等神经功能缺失症状，不仅影响病人的生活质量，而且造成了一定的社会负担[2]。因此，如何减少脑梗死后的神经功能缺失，改善认知功能障碍成为医学研究热点。石菖蒲是具有开窍益智、镇静安神作用的中草药，在心脑血管疾病中有广泛应用[3]。研究表明，石菖蒲中含有的挥发油、有机酸等成分具有抗氧化损伤、镇静、抗惊厥等作用，可保护癫痫大鼠脑神经细胞，改善认知功能障碍[4-5]。目前虽有研究证实石菖蒲有神经保护作用，但关于其在脑梗死中的应用及相关机制研究较少。本研究通过线栓法阻断大脑中动脉建立脑梗死模型，观察石菖蒲对脑梗死大鼠认知功能障碍及神经细胞凋亡的影响，以期为脑梗死药物治疗研究提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠60只，4周龄，体质量180～220 g，购自广东省实验动物监测所，生产许可证号：SCXK(粤)2018-0044，使用许可证号SYXK(粤)2016-0122。自然光线下饲养，12 h昼夜节律，温度22～25 ℃，相对湿度50%～60%，自由进食水，实验前适应性饲养1周。

    1.2 实验药物、主要试剂和仪器

    1.2.1 药物 石菖蒲(北京同仁堂药店，批号160503)，尼莫地平注射液(西南药业股份有限公司生产，国药准字H20064494)。

    1.2.2 实验试剂 兔抗大鼠糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)，磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)，β-连环蛋白(β-catenin)，p-β-catenin，促凋亡基因(B apoptosis cell matrixgene，Bax)，半胱天冬酶3(caspase-3，Casp3)多克隆抗体(美国Santa cruz公司)，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗(福州迈新生物技术开发有限公司)。

    1.2.3 实验仪器 OLYMPUS显微镜(日本奥林巴斯公司)，Leitz1515型组织切片机(德国Leitz公司)，3550 UV酶标仪、7500实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪购自美国Bio-rad公司，Morris水迷宫(安徽淮北正华生物仪器设备有限公司)。

    1.3 脑梗死模型制备 采用改良Z-Longa线栓法造成大脑中动脉闭塞制作脑梗死模型 ......