魏丹丹，李 爽，岳孟龙

    血栓性中风(thrombotic stroke，TS)占中风发病率的80%以上[1]。目前针对TS的治疗以血栓发生早期再灌注时间窗内溶栓取栓和后期恢复性治疗为主[2]。影响血栓形成的因素如凝血酶原、纤溶酶等都参与氧化应激相关通路[3]。此外，丙二醛(malondialdehyde，MDA)等氧化应激产物引发的细胞毒害也是脑损伤过程中神经元凋亡的重要原因[4]。三七是常用于防治心脑血管缺血性疾病的中药，其提取物三七总皂苷(panax notoginseng saponins，PNS)具有抑制血栓形成的作用[5-6]。目前PNS相关研究多在抗栓和抗炎作用上，其在脑栓塞病理过程中抗氧化应激作用方面的研究并不多。本研究以雄性SD大鼠为研究对象，向大鼠颅内颈内动脉注入月桂酸钠进行TS造模，腹腔注射PNS和阳性药物(岩藻黄质)进行干预，观察大鼠行为，评定神经功能损伤，检测氧化应激标志物MDA和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)，神经元核心抗原(NeuN)和胱冬肽酶3(Caspase-3)免疫组织荧光染色鉴定神经元凋亡情况，检测核因子E2相关因子(Nrf2)、Kelch样相关蛋白1(Keap1)、血红素加氧酶1(HO-1) mRNA和蛋白水平，探讨PNS对TS模型大鼠Nrf2/HO-1通路的影响及神经保护作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级成年雄性SD大鼠54只，体重(350±25)g，购自河南省动物实验中心，动物生产许可证号：SCXK(豫)2017-0001。饲养环境：昼夜循环光照(12 h/12 h)，温度(23±3)℃，湿度(43±5)%。

    1.2 主要药品及试剂 三七总皂苷(华中海威基因科技有限公司生产，纯度：HPLC>98%，货号：p31005)；岩藻黄质(成都普瑞法科技开发有限公司生产，纯度：HPLC>95%，货号：BP0603)；TRIzol Invitrogen、TaqMan One Step RT-qPCR Kit、BCA试剂盒均购自北京索莱宝科技有限公司，货号分别为：15596026、T2210、PC0020)；GITC兔抗NeuN单克隆抗体、羊抗小鼠IgG(DyLight?650)、兔抗Nrf2多克隆抗体、兔抗Keap1多克隆抗体、兔抗HO-1多克隆抗体、HRP标记羊抗兔IgG、兔抗GAPDH多克隆抗体、大鼠MDA试剂盒均购自英国abcam公司 ......