宋亚娟，马景红，陈胜强，李守霞，何晓丽，王银龙，张 冰，单铁英，高立威

    阿尔茨海默病(AD)在年龄>65岁的人群发生率较高，病人常表现为认知障碍及行为异常，多由中枢神经系统功能渐进性衰退所致，特异性病理改变为神经细胞外间质存在异常表达的β-淀粉样蛋白(Aβ)堆积[1-3]。相关研究显示，AD病人脑组织Aβ多数透过血脑屏障从血液转运而来的[4-5]。脑部毛细血管内皮细胞和相邻细胞膜之间的紧密连接结构构成了血脑屏障的主要成分，这些成分的活性和含量变化直接影响血脑屏障的功能。本研究体外培养脑微血管内皮细胞株(BMECs)，观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)对细胞活力及细胞膜咬合蛋白、紧密连接蛋白-1表达的影响，经黄芪提取物干预后分析上述指标改变，探讨黄芪提取物对血脑屏障的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 脑微血管内皮细胞及实验试剂 小鼠BMECs由河北医科大学病理教研室提供；Aβ1-40由北京方程生物提供，先溶于蒸馏水中稀释为10 g/L，放入恒温箱1周，灭菌后冷藏。黄芪提取物由恒瑞康生物科技有限公司提供，滴加少量的无水乙醇震摇，再使用适量的蒸馏水配制浓度，灭菌后冷藏。噻唑蓝由上海恒远生化试剂有限公司提供，咬合蛋白及紧密连接蛋白1的第一抗体由菲恩生物科技有限公司提供。Trizol试剂、实时定量聚合酶链反应试剂盒均购自上海生工生物工程有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养及分组 将BMECs接种到底部铺有明胶的中等培养瓶里 ......