李 兵

    随着人们生活水平的提高、膳食结构的改变及人口老龄化的加剧，我国心血管疾病致死率居致死疾病首位，也是我国居民猝死的主要诱因之一[1]。活性氧(reactive oxygen species，ROS)过剩所致氧化应激损伤及ROS诱导细胞凋亡与各种心血管疾病进展密切相关[2]，其中冠状动脉粥样硬化性心脏病、心肌梗死及治疗实现再灌注后引起ROS大量产生过剩[3]。因此，寻找能降低氧化应激损伤、抑制心肌细胞凋亡的新型药物成为目前治疗研究的热点。

    丹参多酚酸盐(salvianolate，SAL)是中药丹参的水溶提取物，具有良好的抗氧化活性[4]，临床主要用于轻度、中度稳定型心绞痛的治疗。过氧化物酶体增殖子活化受体(PPARγ)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗血红素加氧酶-1(HO-1)通路在氧化应激反应中发挥着重要的调控作用[5-6]。本研究以H9c2心肌细胞为研究对象，探讨SAL对H2O2所致心肌细胞氧化应激损伤的影响及PPARγ/Nrf2/HO-1通路在其中发挥的调控作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞 H9c2心肌细胞购自上海中国科学院细胞库。将H9c2细胞接种于含10%胎牛血清、1%双抗的DMEM培养基，置于37 ℃、5% CO2细胞培养箱中培养，每3 d传代1次，取第3代对数生长期H9c2细胞进行实验研究。

    1.2 实验药物与试剂 SAL购自上海绿谷制药有限公司[规格：每瓶50 mg(含丹参乙酸镁40 mg)，批号1903027]；DMEM培养基购自美国Hyclone公司；胰酶、胎牛血清购自美国Invitrogen公司；青链霉素、DMSO、四唑盐(MTT)试剂盒购自上海源叶生物科技有限公司；2，7-双乙酸二氯荧光(DCFH-DA)探针购自美国Sigma公司；兔抗鼠PPARγ、Nrf2、HO-1、核转录因子-κB(NF-κB)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)抗体购自购自Abcam公司；山羊抗兔IgG二抗、ROS试剂盒、电化学发光(ECL)试剂盒、Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒、放射免疫沉淀(RIPA)蛋白裂解液、2 ......