郑 茜，张 勇，杨东伟

    高血压是以体循环动脉血压升高为特征的慢性病，可伴有心、脑、肾等全身重要器官功能和器质性损伤，是心脑血管病重要的危险因素[1]。血管内皮功能受损是高血压的重要发病机制，也是导致各靶器官损害的重要原因，因此，改善血管内皮功能是治疗高血压的重要步骤[2-3]。外泌体(exosome，exo)是能被多数细胞分泌的微小膜泡，可携带来源细胞的特征，与靶细胞受体结合，通过其携带和传递的蛋白、微小核糖核酸(microRNA，miRNA)、信使核糖核酸(messengerRNA，mRNA)等内容物影响受体细胞功能[4]。研究证实，骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)可分化为血管内皮细胞，促进心肌梗死后新血管的形成，并有分化为心肌细胞的能力[5]，因此，BMSCs-exo成为心血管疾病治疗研究的热点。miRNA是外泌体发挥功能的重要物质，miR-132-3p是具有血管形成能力的特异性miRNA，可调控血管内皮功能，且经Exocarta数据库检索发现BMSCs-exo含有miR-132-3p的表达[6]。目前关于BMSCs-exo在心肌梗死、脑缺血缺氧性损伤等方面的研究较多，但在高血压方面的研究鲜见。故本研究通过分离培养诱导BMSCs-exo，干预自发性高血压大鼠(SHR)，分析BMSCs-exo对高血压大鼠血管内皮的影响及机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级雄性SHR 40只，12周龄，体质量260～280 g；SPF级雄性WKY大鼠10只，12周龄，体质量260～280 g；SPF级WKY大鼠5只，2～3周龄，体质量40～50 g。购自广州市白云区龙归兴科动物养殖场，生产许可证号：SCXK(粤)2017-0042。

    1.1.2 药物、主要试剂和仪器 EBM-2、L-DMEM培养液、胰蛋白酶(美国Gibco公司)，Ⅱ型胶原酶、双抗(美国Hy Clone公司)，miR-132-3p高表达组慢病毒颗粒/空载体慢病颗粒(上海吉满生物科技有限公司)，兔抗鼠CD63、CD81、CD34、CD45一抗，辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗(德国默克公司)，内皮素-1(endothelin-1，ET-1)、一氧化氮(nitric oxide，NO)、血栓素B2(thromboxane B2，TXB2)、前列环素(prostacyclin，PGI2)试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)，7500实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)系统(美国Applied Biosystems公司)、CheniDoc XRS化学发光成像分析系统(美国Bio-rad公司) ......