郭施勉，楚英杰

    冠心病是指由冠状动脉血管发生粥样硬化引起的血管狭窄、阻塞，从而造成心肌缺血、缺氧甚至坏死的心脏疾病，是临床上常见的心血管疾病[1]。冠心病主要高发于中老年或合并心血管基础疾病的病人，随着社会人口老龄化的加快以及生活习惯的改变，冠心病发病率逐年增加，由冠心病导致的猝死也时有发生，严重威胁人们的生命健康和安全[2]。人参皂苷Rg1是从人参中提取的一种中药活性物质，研究表明，人参皂苷Rg1在中枢神经系统、免疫系统及抗肿瘤方面均发挥着重要的调节作用[3]。近代药理研究证明，人参皂苷对缺血性心脏病、心律失常、心力衰竭以及心肌缺血再灌注损伤等多种心血管系统疾病具有深远的临床意义，但关于人参皂苷Rg1在心血管系统中的作用仍鲜有报道[4]。研究发现，人参皂苷Rg1对神经细胞内质网的应激反应具有一定的抑制作用，可抑制神经细胞凋亡[5]。本研究拟通过构建大鼠冠心病模型，在体内外实验中观察人参皂苷Rg1对心肌细胞凋亡的作用，为人参皂苷Rg1在冠心病中的作用研究提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级健康雄性SD大鼠50只，体质量(200±20)g，动物房中适应性饲养1周，室温(22±5)℃，相对湿度(50±5)%，通风良好，环境安静，自由饮水、摄食。实验动物购于广东省医学实验动物中心。所有动物实验均经伦理委员会批准。

    1.2 实验试剂 人参总皂苷 Rg1(浙江康恩贝制药股份有限公司)；酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(美国PeproTech公司)；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；Trizol裂解液、BCA蛋白定量试剂盒均购自美国Invitrogen公司；实时荧光定量逆转录试剂盒、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)试剂盒均购自日本TaKaRa公司；兔抗鼠β-actin单克隆抗体、兔抗鼠Bcl-2单克隆抗体、兔抗鼠Bax单克隆抗体、兔抗鼠Caspase-3单克隆抗体均购自美国Abcam公司；Tunel试剂盒(美国Roche公司)；磷酸缓冲盐溶液(PBS)、蛋白上样缓冲液均购自中国上海碧云天生物工程研究所；多聚甲醛、无水乙醇均产自天津化学试剂厂。

    1.3 实验方法

    1.3.1 动物分组与模型构建 本研究采用高脂饮食饲养联合腹腔注射垂体后叶素构建大鼠冠心病模型，每日高脂饮食连续饲养6周后，间隔24 h腹腔注射垂体后叶素30 μg/kg，连续3次[6]。实验大鼠随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1中剂量组及人参皂苷Rg1高剂量组 ......