褚剑锋，王天一，鲁竹青，王乙连，卢 妍，彭美中，彭 军，陈可冀

    《内经》记载：“阙，在下者肝也”“肝大则逼胃迫咽，迫咽则苦膈中，且胁下痛”。“阙”指胸廓，“在下”指季肋部，可见，古人已确定肝的位置位于季肋，与胃、食管、膈相邻，现代解剖学与此论述[1]基本一致。中医学认为“肝者，体阴而用阳也，二者一血一气，一阴一阳，互根互用”。“肝主藏血”为阴，“肝主疏泄”为阳，若肝失疏泄则人体气机失调，导致肝气郁结，甚者肝气上逆，化火伤阴，脏腑阴阳失衡，肝阳上亢而出现烦躁易怒、血压升高等症状或体征[2-3]。此理论为从肝论治高血压提供了理论前提，也为平肝潜阳法治疗高血压奠定了论治基础。清达颗粒是由陈可冀院士防治高血压专方清眩降压汤化裁而来，全方由天麻、钩藤、黄芩、莲子心四味药物组成，共奏清肝热、平肝阳、泻心火之功，对高血压病人降压效果显著[4]。本研究采用自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)模型，观察清达颗粒对血压、心脏功能、血管病理形态及肝脏昼夜节律基因的影响，为探讨清达颗粒的作用机制提供部分生物学基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 Wistar Kyoto(WKY)大鼠8只，SHR 16只，均为雄性，无特定病原体(SPF)级，4周龄，体质量(200±20)g，北京维通利华实验动物技术有限公司提供[实验动物许可证号：SCXK(京)2019-0009]，由福建中医药大学实验动物中心代购并饲养[SYXK(闽)2009-0001]。将16只SHR随机分为模型组(SHR组)和清达颗粒组(SHR+QDG组)，各8只；8只同周龄Wistar Kyoto大鼠作为空白组(WKY组)。分笼饲养，光照/黑夜各12 h，恒温、恒湿，自由进食、饮水。实验过程均严格按照国际动物保护及使用指南进行。

    1.2 主要试剂与仪器 苏木精染色液(北京索莱宝科技有限公司)；伊红染色液(北京索莱宝科技有限公司)；Masson三色染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)；异氟烷(深圳瑞沃德生命科技有限公司)；clock抗体(SAB，33580)；per2抗体(ABclonal，A13168)；bmal1抗体(Abbkine，ABP53154)；即用型免疫组化试剂盒(兔)(福州迈新生物技术开发有限公司)；二氨基联苯胺法(DAB)显色试剂盒(×20)(福州迈新生物技术开发有限公司)；CODA无创鼠尾血压系统(美国 Kent Scientific公司)；DM400B显微镜(德国莱卡仪器有限公司)；生物自动脱水机(湖北孝感亚光医用电子技术有限公司)；生物组织石蜡包埋机(湖北孝感亚光医用电子技术有限公司)；全自动石蜡切片机(德国徕卡仪器有限公司)；小动物超声影像系统(加拿大VisualSonics公司)；Vevo LAB软件(富士 VisualSonics公司) ......