LncRNA SNHG7对小鼠心肌梗死后心肌细胞损伤的保护作用
1材料与方法,2结果,3讨论
赵瑞彪,单会艳,俞艳华心肌梗死是临床常见的心血管疾病,近年来,心肌梗死发病率与死亡率逐年上升,已严重影响人们生活质量,非编码RNA属于组织特异性的RNA分子,其具有高度保守性,并可调控细胞增殖及凋亡等过程从而参与心血管疾病发生、发展过程,其中,微小RNA(miRNA)与长链非编码RNA(LncRNA)在心血管疾病中表达异常,并可能作为减轻心肌细胞损伤的治疗靶点[1-5]。长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)在骨关节炎中表达水平降低,上调其表达可抑制软骨细胞凋亡及促进细胞增殖[6]。但SNHG7在小鼠心肌梗死后心肌细胞损伤中的作用机制尚未阐明。本研究旨在探讨SNHG7过表达对小鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡及炎症损伤的影响及其可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 40只无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,12周龄,死亡4只,剩余36只,动物许可证号SXCK(京):2016-0008。大鼠心肌细胞H9C2购自美国ATCC细胞库;Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司;miR-223 mimics、miR-NC、si-NC、si-SNHG7购自上海吉玛制药技术有限公司;Trizol、cDNA合成、荧光定量购自美国Thermo Fisher公司;缺口末端标记法(TUNEL)染色试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司;兔抗鼠脂肪酸合成酶(Fas)、Cleaved Caspase-3抗体购自美国Santa Cruz公司;辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔二抗购自武汉艾美捷科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 建立小鼠心肌梗死模型 采用2%水合氯醛(100 mg/kg)麻醉小鼠,切开气管,使用呼吸机辅助呼吸(7~8 mL),120次/min,呼吸比1∶2,在第4肋间入胸,识别前降支走行范围,采用滑线(7/0)结扎前降支,同时进行苏木素-伊红(HE)染色与Masson染色,观察小鼠心电图示波,若左心室前壁部分颜色转为苍白且具有心肌梗死的临床表现时则视为模型制作成功[7] ......
您现在查看是摘要页,全文长 8272 字符。