吕麦扣，席 聪

    癫痫是一种中枢神经系统慢性疾病，由脑部神经元同步化异常放电导致，临床表现的主要特征为短暂性、反复性、发作性和刻板性，目前仍缺乏有效的预防和治疗措施[1]。神经元损伤是癫痫发作的最终结果，也是引起癫痫再发及形成难治性癫痫的主要原因[2]。因此，寻找有效的减轻神经元损伤的方法具有重要意义。环状RNA(circular RNAs，circRNAs)是一类具有5′末端帽子和3′末端 poly A尾结构的单链环状、共价闭合的非编码RNA，可通过多种机制广泛调控多种疾病的进程[3-4]。研究表明，circRNAs与中枢神经系统发生发展密切相关[5]。含HECT结构域的E3泛素链接酶(HECT domain E3 ubiquitin ligase，HECTD1)在多种细胞中均有表达，且发挥多种功能[6-7]。研究显示，在小鼠短暂性大脑中动脉闭塞模型中，缺血脑组织中circ_HECTD1表达升高，急性缺血性脑卒中病人血浆样本circ_ HECTD1表达升高，抑制circ_HECTD1表达可减少梗死面积，减轻神经元损伤[8]。circ_HECTD1对癫痫的影响及机制尚未明确。因此，本研究建立无镁癫痫模型细胞，检测沉默circ_HECTD1表达对海马神经元细胞活力、凋亡率及炎性因子表达的影响，并进一步研究其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 健康的24 h新生SD大鼠，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。动物操作按照西安交通大学实验动物伦理要求进行。DMEM/F12培养基、胎牛血清、蛋白酶K均购自美国Gibco公司；四唑盐(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、多聚赖氨酸均购自美国Sigma公司；DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)试剂盒购自德国Roche公司；SDS-PAGE凝胶制备试剂盒、5×蛋白上样缓冲液、BCA蛋白定量试剂盒、ECL发光液均购自碧云天生物技术有限公司；B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved caspase 3和核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B ......